干扰podoplanin的表达对人早孕期蜕膜基质细胞生物学功能影响的研究

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3、基质细胞生物学功能的影响研究中文摘要目的：探讨跨膜糖蛋白podoplanin在人早孕期母胎界面的表达及其对蜕膜基质细胞增殖及侵袭等生物学功能的影响。方法：收集正常早孕期蜕膜及绒毛组织，应用本实验室建立的胰酶消化、密度梯度离心法分离和培养蜕膜基质细胞(decidualstromalcells，DSCs)和滋养细胞(trophoblasts，Tros)。采用免疫组织化学、免疫细胞化学以及流式细胞术分别检测podoplanin和及其受体C型凝集素样受体一2(C—typelectin．1ikereceptor．2，CLEC．2)的表达水平和特点；并以siRNA干扰技术沉默蜕

4、膜基质细胞podoplanin的表达，然后采用MTT比色法检测其活力、BrdU细胞增殖ELISA法检测其增殖能力、以流式细胞术分析其凋亡情况以及Transwell法分析podoplanin沉默后细胞侵袭能力的改变。结果：正常早孕蜕膜基质细胞和滋养细胞均表达podoplanin和CLEC．2，podoplanin在DSCs的表达水平显著高于Tros者，而CLEC．2在Tros和DSCs中表达水平均较低；采用siRNA干扰podoplanin在DSCs的表达后，在显著降低细胞活力并抑制细胞增殖和侵袭能力的同时，促进了该细胞的凋亡。结论：人早孕期母一胎界面均表达podop

5、lanin及其受体CLEC．2，且podoplanin在蜕膜基质细胞的表达水平较高，提示podoplanin可能通过与内源性受体CLEC．2的相互作用参与调节DSCs的生物学功能并维持正常妊娠。Podoplanin可能在促进蜕膜基质细胞的增殖和侵袭、抑制其凋亡的信号通道中发挥着中介作用，这种作用有利于维持细胞自身的正常生物学功能和调节滋养细胞侵袭过程，从而最终有利于胎盘的形成和正常妊娠的维持。关键词：podoplanin；CLEC．2；蜕膜基质细胞；增殖；侵袭；早孕期作者：侯艳丽指导老师：谢可鸣李大金原书空白页不缺内容原书空白页不缺内容英文摘要干扰Podoplani

6、n的表达对人早孕期蜕膜基质细胞生物学功能的影响研究EffectofSilencingPodoplaninExpressiononBiologicalFunctionofDSCsinHumanFirst-·trimesterPregnancyAbstractObjectiveToexploretheexpressionleveloftransmembraneglycoproteinpodoplaninindecidualstromalcells(DSCs)atmaternal—fetalinterfaceinthefirst—trimesterpregnancyand

7、itseffectonthebiologicalfunctionofthemselves．MethodsAllthedeciduasandvilliswerecollectedfromtheearlypregnancy．DSCsandtrophoblastswereisolatedbydigestinganddensitygradientcentrifugationandthencultured．Afterthat，theexpressionlevelsofpodoplaninanditsreceptorCLEC一2weredetectedapplyingthe