a群奈瑟脑膜炎球菌荚膜多糖_破伤风类毒素结合物的制备及其工艺稳定性

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1、1338中国生物制品学杂志2010年12月第23卷第12期ChinJBiologicalsDecember2010，Vol.23No.12··中国图书分类号R378．1＋5R392-33文献标识码A文章编号1004-5503（2010）12-1338-05【预防制品】A群奈瑟脑膜炎球菌荚膜多糖-破伤风类毒素结合物的制备及其工艺稳定性刘方蕾吴兵王晶袁菲赵志强杨明谢贵林【摘要】目的按初步确定的工艺，制备A群奈瑟脑膜炎球菌荚膜多糖（GroupANeisseriameningococcuscapsula

2、rpolysa-ccharide，GAMP）与破伤风类毒素（Tetanustoxoid，TT）的结合物，通过监测关键工艺参数，分析该工艺的稳定性。方法制备8批GAMP-TT结合物，经Sepharose4FF柱层析纯化后，进行各项生化鉴定，采用双向免疫扩散试验检测其抗原性，以结合物皮下免疫小鼠，ELISA检测小鼠血清中抗GAMP及抗TTIgG抗体水平。结果制备的8批结合物工艺关键参数较稳定，均保持GAMP抗原特异性；免疫小鼠后，均可诱生较高水平的血清抗GAMPIgG抗体，并可诱生免疫加强应答。结论

3、该制备工艺稳定，为GAMP-TT结合疫苗的研制提供了参考。【关键词】A群脑膜炎球菌；荚膜多糖；破伤风类毒素；结合疫苗；工艺稳定性PreparationofGroupANeisseriameningococcusCapsularPolysaccharide-TetanusToxoidConjugateandStabilityofPreparationProcedureLIUFang-lei，WUBing，WANGJing，YUANFei，ZHAOZhi-qiang，YANGMing，XIEGui-

4、lin（LanzhouInsti－tuteofBiologicalProducts，Lanzhou730046，China）【Abstract】ObjectiveTopreparegroupANeisseriameningococcuscapsularpolysaccharide（GAMP）-tetanustoxoid（TT）conjugatebyapreliminarilydevelopedprocedure，andanalyzethestabilityoftheprocedurebymoni

5、toringthekeytechnologicalpa－rameters．MethodsEightbatchesofGAMP-TTconjugatewereprepared，thenpurifiedbySepharose4FFcolumnchromatography，subjectedtobiochemicalassay，anddeterminedforantigenicitybydoubleimmunodiffusiontest．Micewereimmunizeds．c．withtheconj

6、ugateanddeterminedforIgGlevelsagainstGAMPandTTinserabyELISA．ResultsThekeytechnologicalparametersduringpreparationoftheeightbatchesofconjugatewerestable．Alltheeightbatchesofconjugateshowedantigenicspecificity，inducedhighIgGtitersagainstGAMPandTTinsera

7、andinducedboosterresponseofmice．ConclusionsTheprocedurewasstable，whichprovidedareferenceforthepreparationofGAMP-TTconjugatevaccine．【Keywords】GroupAmeningococcus；Capsularpolysaccharide；Tetanustoxoid（TT）；Conjugatevaccine；Technologicalsta－bility［5］奈瑟脑膜炎

8、球菌（Neisseriameningococcus）是幼儿和免疫缺陷患者对多糖抗原的免疫反应性。细菌性脑膜炎和脓毒血症的主要致病菌，全球由脑破伤风类毒素（Tetanustoxoid，TT）在人体内安全性膜炎球菌引起的脑膜炎发病率及病死率很高，由其良好，因此在制备结合物时，选择TT作为蛋白质载［1-3］［6］导致的败血症死亡率高达20％～50％。脑膜炎体。本实验在前期研究的基础上，按照初步确定奈瑟菌按荚膜多糖的抗原性和化学性质不同可分为的工艺，用化学方法制备多批A群奈瑟脑膜炎球菌13个血清群，其中