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1、山东化工!12!SHANDONGCHEMICALINDUSTRY2010年第39卷黑曲霉产-葡萄糖苷酶发酵条件的研究赵子高,吕世峰,杨付伟,闫振丽,王林凤(河南天冠企业集团有限公司,河南南阳473000)摘要:通过单因素及正交实验对现存黑曲霉菌株产酶发酵条件进行了研究,结果表明:当培养基为:玉米芯4.0%;酵母粉1.0%;KH2PO40.4%;MgSO40.08%;(NH4)2SO40.4%;培养温度30,摇床转速220r/min,接种量6.0%,装液量40mL/250mL,初始pH值5.0,发酵周期
2、168h;此条件下-葡萄糖苷酶酶活达56.96IU/mL。关键词:黑曲霉;-葡萄糖苷酶;培养基;酶活力;发酵条件中图分类号:TS201.3文献标识码:A文章编号:1008-021X(2010)09-0012-04StudyonFermentationConditionofAspergillusNigerProducing-glucosidaseZHAOZi-gao,LShi-feng,YANGFu-wei,YANZhen-li,WANGLin-feng(HenanTianguanGroupCo.,Ltd.,N
3、anyang473000,China)Abstract:AnAspergillusnigerproducing-glucosidasewasselected.Itsmediumingredientsandfermentationconditionswereoptimizedbysinglefactorandorthogonalexperiments.Theresultswereasfollows:corncob4.0%;yeast1.0%;KH2PO40.4%;MgSO40.08%;(NH4)2SO40.4%;culturetem
4、perature30,rotationspeed220r/min,inoculationvolume6.0%,theamountofliquid40mL(250mLcanonicalflask),initialpH5.0andfermentationtime168hours.Undertheseconditions,Theactivityof-glucosidasewasreach56.96IU/mL.Keywords:aspargillusniger;-glucosidase;culturemedium;enzymeactivi
5、ty;fermentationcondition能源短缺是本世纪面临的重大问题之一,从长显得尤为重要。对-葡萄糖苷酶液体发酵的研究[2-4]远利益及能源的可再生性来看,燃料乙醇作为一种报道颇多。本文对现存的黑曲霉菌株进行了培潜力巨大的生物能源,如何合理有效开发这种能源养基及培养条件的优化,以期为原料采购及生产提是多年来世界共同关注的问题。受粮食危机影响,供技术支持。利用非粮作物主要成分纤维素生产燃料乙醇则是一1材料与方法个重要的研究方向。纤维素作为植物光合作用的主1.1材料要多糖类产物,是地球上最为丰富的可再生资源,占菌株:
6、黑曲霉(Aspergillusniger,河南农业大学地球总生物量的40%左右。然而,目前大约80%的提供)。纤维素未被开发利用,因此具有极为诱人的开发前1.2主要仪器与试剂景。1.2.1试剂纤维素需在纤维素酶作用下水解为葡萄糖才能纤维二糖,柠檬酸,柠檬酸三钠,(NH4)2SO4,为微生物所利用;纤维素酶大致由3种水解酶类组KH2PO4,MgSO4!7H2O,CaCl2等,SBA系列专用葡成:-葡聚糖苷酶、纤维二糖水解酶和-葡萄糖萄糖标准液及缓冲剂(除非特别说明,实验用化学苷酶,在纤维素的降解过程中,从纤维素分解成葡萄试剂均为
7、分析纯),玉米芯,麸皮均为粉碎后过糖需要以上3种酶的协同作用;其中-葡萄糖苷270m筛。酶(EC3.2.1.21)将纤维二糖以及纤维素寡糖降解1.2.2仪器[1]为葡萄糖,是纤维素水解糖化过程的限速步骤;恒温振荡器(SHA-C,国华企业集团),LDZX如何提高-葡萄糖苷酶在纤维素水解过程中活力-50B立式电热压力蒸汽灭菌锅(上海东亚压力容收稿日期:2010-08-18基金项目:国家科技支撑计划项目(2007BAD66B01)作者简介:赵子高(1977),河南南阳人,硕士研究生,研究方向为微生物酶制剂研究与开发。第9期赵
8、子高,等:黑曲霉产-葡萄糖苷酶发酵条件的研究!13!器制造有限公司),DELTA320pH计(米特勒),1.3.6产酶活力测定[5-6]SBA生物传感分析仪(山东省科学院),TDL-5C离参照文献加以改进,利用-葡
