不同发育期中华绒螯蟹胚胎离体孵化和幼体培育的研究

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1、第20卷第3期大连水产学院学报VoL2ONn32005年9月JOURNALOFDALIANFISHERIESUNIVERSITYs~p．2005文章编号：11300-9957(2005)03—0192—06不同发育期中华绒螯蟹胚胎离体孵化和幼体培育的研究王吉桥，张涛，佟鹰，刘晶，罗鸣，刘伟峰，耿伟，张玉满(1．大连水产学院生命科学与技术学院，辽宁大连116023；2．盘锦每日集团有限公司，辽宁盘锦124212)摘要：将中华绒螯蟹Eriocheirsinensis不同发育期的胚胎从腹肢基部剪下后在室温下孵化，结果表明，处于卵裂期、囊胚期和原肠期的胚胎离体孵化的孵化率(42．16％一5

2、4．90％)无显著差异(P>0．05)；从原肠期开始，离体孵化的孵化率随着离体时间的缩短呈升高的趋势，即眼点期(68．95％±5．89％)和心跳期(77．47％±5．45％)极显著高于(P<0．01)前3个时期，对外界环境的适应性也增强，这5个时期离体胚胎孵出的溢状幼体的变态率差异不显著(P>0．05)。试验证明，剪掉抱卵腹肢进行胚胎离体孵化，不但促进了亲蟹卵巢的快速发育，而且还降低了投喂、调节水质等费用。关键词：中华绒螯蟹；受精卵；离体；幼体；发育期；孵化中图分类号：$966．16文献标识码：A中华绒螯蟹Eriocheirsinensis(以下简称河蟹)等蟹类受精卵的胚胎是在母体

3、的腹肢上发育，故人工孵化时需精心饲养抱卵蟹，科学调节水质，因而增加了亲蟹的生产成本。若能将河蟹受精卵离体孵化，则可减少抱卵蟹的饲养管理成本，实现低成本、高效益地培育蟹苗。河蟹卵离体孵化必须以深人了解蟹类亲体与卯之间的生物学和生态学联系为基础。Lee等和堵南山等从甲壳动物染色体操作和河蟹受精生物学研究角度证明，离体的河蟹卵能正常发育。鲍鹰等l4成功地在4~C和8~C下保存离体河蟹受精卵，孵出了涵状I期幼体，但未进行幼体培育。之后，刘学军等l5和顾功超等[6¨曾对刚死亡的抱卵河蟹胚胎进行离体孵化，发现从死亡9h以内的抱卵蟹剪下来的胚胎孵化率较高。李悦悦等比较了用孔雀石绿、福尔马林和亚甲

4、基蓝防治河蟹离体胚胎孵化中真菌病的效果。陈文虎等为减少抱卵蟹死亡所造成的损失，成功地将心跳后期的河蟹胚胎剪下来孵化并培育出大眼幼体。但是，有关河蟹早期胚胎离体孵化和幼体培育的效果及剪掉卵后亲蟹的存活、生长和性腺发育等尚未见报道，为此，作者对早期河蟹胚胎离体孵化和幼体培育进行了研究，且取得了较好的效果。1材料与方法1．1材料试验于2003年4～6月和2003年lO月～2004年4月分别在盘锦每日集团有限公司苗种繁育基地和大连水产学院养殖实验室进行。试验共用抱卵蟹104只，取自盘锦每日集团有限公司和江苏省连云港辛兴农场育苗基地，其中23只为一次抱卵蟹(5只为刚死不久的)，体重(湿重)4

5、O～75g；41只为二次抱卵蟹，体重(湿重)35～108g；50只(一次抱卵蟹)，体重60～120g，用于不同胚胎发育期离体卵的孵化试验。孵化容器为1．0rnX0．5rnX0．3rn的红色塑料浴盆。孵化用水为经沉淀、过滤收稿日期：2004-07—14基金项目：教育部“新世纪高等教育教学改革工程”资助项目(1292B0611)作者简介：王吉桥(1950一)，男，博士，教授。Email：jqwang1950@163．ooln第3期王吉桥，等：不同发育期中华绒螯蟹胚胎离体孵化和幼体培育的研究193的生产用水，水温为16．0～25．0℃，盐度为30．0～34．0。试验中连续充气，溶解氧大于

6、4．5mg／L。1．2方法将亲蟹的腹面朝上，用手轻轻掀开腹部，使腹部与头胸部呈45。，用手术剪从底节剪下附卵的腹肢，经高锰酸甲消毒后挂到自制的挂卵器上，充气孵化。采用常规管理方法进行孵化和幼体培育。1．2．1离体卵与非离体卵的孵化将4只同一胚胎发育期的抱卵蟹第4对腹肢上的卵剪下，缚在挂卵器上，放在浴盆中孵化(A组)，然后将这4只蟹再放在另一浴盆中孵化(B组)。1．2．2新月期和心跳期胚胎离体后的孵化分别将处于新月期和心跳期(65~／min)的胚胎剪下后按“1．2．1”方法孵化，观察其孵化特点，计算孵出幼体的成活率。1．2．3离体后孵出幼体的成活率将正常孵出和离体孵出的I期潘状幼体(

7、Z期)放在盛水的泡沫箱(0．4ITI×0．4ITI×0．13ITI)中，密度为100爪／L，投喂褶皱臂尾轮虫Brochionusplicatilis，投喂量分别为3、6、9-'~／mL水。采用下列方法测定由离体胚胎孵出的z期所培育出的大眼幼体(M期)的生活力：①将3～4日龄的大眼幼体从盐度为27的水中取出，分别放人5个盛水40L的泡沫箱(盐度分别为20、l5、l0、5、0)中，每箱放人200个幼体，24、48h后观察幼体的成活率；②将上述大眼幼体分别放人4个盛水40L