大叶风兰组培快繁技术体系的研究

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1、北方园艺2OLO(]O)：173～175·生物技术·大叶风兰组培快繁技术体系的研究王裕，韩磊，丁雪珍，丁世民(潍坊职业学院，山东潍坊261031)摘要：通过大叶风兰的花梗腋芽诱导出无菌植株，再利用无菌植株茎尖诱导形成原球茎，成功地诱导分化形成了再生植株，筛选出了花梗腋芽启动、原球茎诱导、增殖、生根以及过渡培养等培养基配方．形成一套完整的大叶风兰组培快繁技术体系。关键词：大叶风兰；组织培养；快速繁殖中图分类号：S682．31文献标识码：A文章编号：1001-0009(2010)10一一0173一O3大叶风兰(Neofinetiacate)属附生

2、兰类，主要产试验目的是将花梗腋芽启动，形成营养芽，在三角于韩国、日本。喜欢温暖、潮湿、半阴、通风的环境。植株瓶内长成无菌植株，以便利用无菌植株的茎尖诱导原球娇小，是近几年从韩国引进的“香花洋兰”。风兰的根、茎进行快速繁殖。花梗腋芽接种在营养芽诱导培养茎、叶和花都是观赏对象，具有株型迷你。造型奇特，花基上，7d左右腋芽开始萌动膨大。30d左右长出小叶。具异香等特点，越来越受到人们的青睐，市场开发价值研究结果表明，不同激素及其浓度配比对于花梗腋较大。尽管在市场上已占据了一定位置，但与蝴蝶兰、芽启动培养的影响差异显著(表1)。代号A2培养基大花蕙兰

3、比较，日前应属稀有品种。大叶风兰若采用MS+6一BA2．0mg／I出芽率最高，达9o。传统的分株繁殖，每年每株仅繁殖2～3个芽，繁殖系数表1不同激素组合对花梗腋芽启动培养的影响很低，繁殖速度慢、周期长，难以迅速占领市场，满足需培养6BANAA接种数出芽数出芽率基代号rng．I1／mg．I个／个／求。应用组织培养技术，可以加快繁殖速度，进行工业A11．0010031．531．5d化生产。]。以新引进的大叶风兰优良品种为材料，将大A22．00l0090．090．0a叶风兰的花梗腋芽诱导培养生成无菌植株，再利用无菌A33．0010076．576．5

4、bA440010055．055．0c植株茎尖诱导形成原球茎，成功地诱导分化形成了再生A51．00．510026．526．5d植株，达到快速繁殖的日的。A62．00．510035．035．0dA73．00．510050050．0c1材料与方法A84005l0036．536．5d1．1试验材料注：小写字母代表P<0．05的显著水平，以F同。选取大叶风兰未开花的带腋芽花梗为供试材料。2．2原球茎诱导1．2试验方法将花梗腋芽试管苗的茎尖接种在原球茎状体诱导1．2．1消毒选取大叶风兰未开花的带腋芽花梗，用流培养基上，40d后比较试验结果。不同激素组合的

5、诱导水冲洗30n1in后，切成长约2～3cm带腋芽的花梗节，情况见表2。用无菌滤纸吸干水分，用70的酒精浸泡20~30S后，表2不同激素种类和浓度对诱导原球茎的影响用无菌水冲洗5遍，再用0．1的升汞分别浸泡15min，无菌水冲洗5～8次，用无菌滤纸吸干水分。代号／nag．·LJ／rag．·L一1／个／个／N1．2．2培养基采用MS+蔗糖20L+琼脂粉3．5Bl6．00．51003232cB25．00．51006363bg／L+活性炭1．5g／L+不同激素组合，pH5．4的培养1334．00．51o09494a基，培养温度(25±2)。C，光照

6、强度1500lx，光照时间l2B43．00．51004545ch／d。B52．00．51003434c1361．00．51002222d2结果与分析B74．00．2l007676b2．1花梗腋芽启动培养I383．00．21005050bB92．00．21003131cB101．00．21002020d第一作者简介：王裕(1978-)，女，山东潍坊人，硕士，主要研究方向为生物技术及应用。E-mail：qqwy2008@163．COiTI。试验结果表明，不同激素组合对原球茎诱导率影响收稿日期：2010-01—29差异显著。所有组合都可以诱导出原球

7、茎，在相同浓度173·生物技术·北方园艺2olo(1o)：173～175的N从下，高浓度6-BA对原球茎诱导有明显促进作培养基生根平均根数不同，E2组合平均根数达3．1条，用，但高于5．omg／L则会抑制其生长。其中组合这说明6-BA和NAA配合使用比单独使用NAA或MS+6-BA4．0mjg／L+NAA0．5mg／L诱导率最高，IBA更有利于生根。6-BA1．0mg／L时平均根数多，使达94％。用NAA比IBA生根数略多，且考虑到NAA在培养基2．3原球茎增殖灭菌过程中稳定，并且价格比IBA低，所以生产中以用原球茎继代增殖应在转绿之前，将原

8、球茎切成小块6-BAl_0mg／L和NAA0．5nag／L配合作为生根剂(3ram)，并给予针刺损伤]，接种在不同激素组合的原为好。球茎增殖培养基上，培养时间为30