基于层次分析法的金葡菌皮肤感染模型研究及多枝雾水葛干预作用

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1、广东药科大学硕士研究生学位论文分类号:___________密级:__________UDC:___________基于层次分析法的金葡菌皮肤感染模型研究及多枝雾水葛干预作用姓名:邹国发学号:2111548001院系:中药学院学位类型:学术学位专业:中药学研究方向:中药及复方药理和毒理学研究导师:陈艳芬教授论文提交日期:2018年5月25日论文答辩日期:2018年5月18日学位授予单位:广东药科大学二〇一八年五月广东药科大学硕士研究生学位论文Studyonstaphylococcusaureusskininfectionmodelbasedonanalytic

2、hierarchyprocessandinterventioneffectofPouzolziazeylanicavar.microphyllaCandidate:GuofaZouStudentID:2111548001Affiliation:SchoolofTraditionalChinesemedicineAcademicDegreeApliedfor:MasterofMedicineSpeciality:ChineseMateriaMedicaSupervisor:Prof.YanfenCHENDayofDefence:May2018Degree-Con

3、ferring-Institution:GuangdongPharmaceuticalUniversityMay2018广东药科大学硕士研究生学位论文基于层次分析法的金葡菌皮肤感染模型研究及多枝雾水葛干预作用摘要目的:为了制定皮肤病动物模型技术标准和多层面的动物模型评价体系,本研究模拟临床皮肤感染建立常见皮肤金黄色葡萄球菌感染动物模型,运用层次分析法(AnalyticHierarchyProcess,简称AHP)建立综合评价指标权重,筛选出优质的动物模型,并以习用药材多枝雾水葛为例,将构建的模型应用于中药药效评价,从而为感染性皮肤疾病的防治研究带来积极的推动作

4、用。方法:1.细菌计数方法的确定:首先开展了固体培养基培养条件下金黄色葡萄球菌计数方法的相关性研究,主要是麦氏比浊法、平板计数法、血球计数法和金葡菌浓度的相关性比较研究。然后,利用OD值法结合平板计数法制定了OD值与细菌浓度的标准曲线。2.皮肤感染动物模型评价体系的确定:首先经过动物皮肤感染模型评价指标调研,初步筛选综合评价指标,经过层次分析法确定层次结构,专家咨询确定各评价指标权重及制定各评价指标的评分标准。3.基于层次分析法的动物模型研究:(1)小鼠皮肤金黄色葡萄球菌感染脓肿模型研究:88只SPF级昆明种小鼠,雌雄各半,随机I广东药科大学硕士研究生学位论文

5、分为对照组、低浓度组、中浓度组、高浓度组,分别皮下接种0.1ml/只的0.9%NaCl、1×109CFU/ml、1×1010CFU/ml、5×1010CFU/ml金葡菌的方式建立模型。(2)小鼠皮肤金黄色葡萄球菌感染溃疡模型研究:198只SPF级昆明种小鼠,雌雄各半,随机分为方形、圆形及刮伤的对照组、低浓度组、高浓度组等9各组,分别在伤口接种0.1ml/只的0.9%NaCl、1.36×109CFU/ml、1.36×1010CFU/ml金葡菌的方式建立模型。(3)大鼠皮肤金黄色葡萄球菌感染溃疡模型研究:108只SPF级SD大鼠,雌雄各半,随机分成溃疡直径分别为1

6、.5cm、2cm的对照组、低浓度组、高浓度组等6各组,动物背部脱毛区剪下直径为1.5cm、2cm的全层皮肤,分别接种0.2ml/只的0.9%NaCl、1.18×109CFU/ml、1.18×1010CFU/ml金葡菌的方式建立模型。各模型分别采用体征变化、皮肤病变外观、病原学检测、形态学观察等指标进行综合评价。4.动物模型在多枝雾水葛软膏(PZO)药效评价中的应用:多枝雾水葛(Pouzolziazeylanica(L.)Benn.var.Microphylla(Wedd.)W.T.Wang.)是荨麻科雾水葛属药用植物,其主要功效为解毒消肿,接骨,用治疖疮炎肿等

7、感染性疾病。我们利用上述构建好的皮肤微生物感染动物模型,按照中药新药临床前药理研究方案对其软膏制剂进行药效评价:(1)小鼠皮肤脓肿模型药效评价:84只小鼠随机分为模型组、基质组、PZO-低组(0.25g/kg)、PZO-中组(0.5g/kg)、PZO-高组(1g/kg)、龙珠组、百多邦组,分别皮下接种菌量为1.0×109CFU建立脓肿模型,采用体重变化、脓肿体积变化、皮肤细菌逆培养、皮肤II广东药科大学硕士研究生学位论文病理切片等指标进行综合评价。(2)小鼠皮肤溃疡模型药效评价:72只小鼠随机分为基质组、PZO-低组(0.25g/kg)、PZO-中组(0.5g

8、/kg)、PZO-高组(1g/kg)、

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