白藜芦醇对高糖培养的大鼠胸主动脉平滑肌细胞mcp-1、vcam-1表达的影响及机制研究

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1、河北医科大学学位论文使用授权及知识产权归属承诺本学位论文在导师(或指导小组)的指导下，由本人独立完成。本学位论文研究所获得的研究成果，其知识产权归河北医科大学所有。河北医科大学有权对本学位论文进行交流、公开和使用。凡发表与学位论文主要内容相关的论文，第一署名为单位河北医科大学，试验材料、原始数据、申报的专利等知识产权均归河北医科大学所有。否研究生签名：导师签章：二级学院河北医科大学研究生学位论文独创性声明本论文是在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果，除了文中特别加以标注和致谢等内容外，文中不包含其他人已经发表或撰写的研究

2、成果，指导教师对此进行了审定。本论文由本人独立撰写，文责自负。研究生签名：茜裢娟导师签章：砂纬．!I‘砂，多年多月2_7B目录中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯1英文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯4研究论文白藜芦醇对高糖培养的大鼠胸主动脉平滑肌细胞MCP．1、VCAM-1表达的影响及机制研究前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．8日{J舌⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．8材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

3、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯9结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．19附图⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．21附表⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯26讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．29结论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯33参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯33综述MCP．1与糖尿病血管病变⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．：37致

4、谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯47个人简历⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯48中文摘要白藜芦醇对高糖培养的大鼠胸主动脉平滑肌细胞MCP-1、VCAM-1表达的影响及机制研究摘要目的：糖尿病(diabetesmellitus，DM)大血管并发症包括高血压、冠心病、脑血管疾病及周围血管疾病，是糖尿病患者死亡的首要原因。大血管病变的主要病理基础是动脉粥样硬化(atherosclerosis，AS)，炎症及血管平滑肌细胞(vascularsmoothmusclec

5、ells，VSMCs)的增殖在动脉粥样硬化发展过程中起着关键作用。白藜芦醇(resveratrol，Res)是一种自然界中少量存在的非黄酮多酚类化合物，富含于葡萄、虎杖、松树等多种植物中，是植物在应激状态下产生的一种强抗氧化剂，具有抗氧化与抗自由基、抗炎、调节免疫、心血管保护作用、调脂、降低血糖、改善胰岛素抵抗、抗肿瘤及雌激素样活性等广泛的生物学和药理学作用。白藜芦醇可以通过抗氧化、抗炎症反应、抑制VSMCs增殖等作用，防止动脉粥样硬化的发生。核因子．心(nuclearfactor-kappaB，NF．rd3)是一种转录因子，

6、存在于单核细胞、血管平滑肌细胞及血管内皮细胞中，在动脉粥样硬化的发生发展过程中起着关键性作用。单核细胞趋化蛋白．1(monocytechemoattractantprotein．1，MCP．1)，血管细胞粘附分子．1(vascularcelladhesionmolecule．1，VCAM-1)，均是NF．r．B通路上的下游因子。NF．r．B的激活及各种损伤性刺激可以通过NF．rB信号转导途径，诱导MCP．1与VCAM．1的表达，促进外周血白细胞．单核细胞黏附、趋化并迁移至内皮下，吞噬脂质转化为泡沫细胞，促进VSMCs增殖，参与

7、AS的发生和发展。本实验通过不同葡萄糖浓度培养大鼠胸主动脉VSMCs，观察VSMCs增殖以及NF．rd3、MCP．1、VCAM．1的水平变化，同时应用白藜芦醇和P13K特异性抑制剂LY294002进行干预，观察白藜芦醇对VSMCs增殖的影响，探讨白藜芦醇的抗AS作用的可能机制，为白藜芦醇的临床应用提供实验室依据。实验方法：1细胞培养：以大鼠胸主动脉平滑肌细胞株A7r5(细胞株购自中国培中文摘要养物典藏中心)为研究对象。将血管平滑肌细胞株接种于培养瓶中，放于37℃、5％CO：孵箱中孵育，待细胞铺满瓶底的90％后进行传代。取处于对

8、数生长期的细胞分别接种于50ml培养瓶和96孔培养板培养48小时，后更换于无血清DMEM培养基培养24小时，使细胞生长同步化，然后分组进行实验：①正常对照组(NG组，含5．5mmol／L葡萄糖)②高糖培养组(HG组，含25mmol／L葡萄糖)③N(H抑制剂LY294002组(