活血化瘀通络中药对糖尿病大鼠肾脏的保护作用及其对血管内皮生长因子的影响

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1、目录中文摘要⋯⋯⋯⋯k⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯1英文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·5研究论文活血化瘀通络中药对糖尿病大鼠肾脏的保护作用及其对血管内皮生长因子的影响前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯...⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯9日!J舌⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯”...⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·9材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..10结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·22附图⋯⋯

2、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯··26附表⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.42讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.44结论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.46参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯46综述血管内皮生长因子与糖尿病肾病⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯49致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯57个人简历⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

3、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..58中文摘要活血化瘀通络中药对糖尿病大曩肾脏的保护作用及其对血管内皮生长因子的影响摘要目的:应用链脲佐菌素(Streptozotocin,STZ)诱导SD大鼠建立糖尿病(diabetesmellitus,DM)模型,给予活血化瘀通络中药复方及厄贝沙坦对该模型进行干预,通过观察大鼠的一般情况、生化指标、肾脏病理形态学变化以及肾皮质组织中血管内皮生长因子(vascularendothelialgrowthfact瓯VEGF)的表达水平,来探讨VEGF与糖尿病肾病(diabeticnephropat

4、hy,DN)的关系,以及活血化瘀通络中药复方对糖尿病大鼠肾脏的保护作用及可能机制,为临床上治疗糖尿病肾病提供实验依据。方法:清洁级健康雄性SD大鼠48只,体重9¨1209,适应性喂养一周后随机分为正常组(c)10只,造模组38只。造模组大鼠禁食12h后,一次性腹腔注射STZ55mg/kg,正常组注射等体积枸橼酸缓冲液。3天后随机血糖大于16.7mmol/1的大鼠为造模成功,死亡和未达标者予以剔除。造模成功后,将造模组大鼠随机分为模型组(M)11只,活血化瘀通络中药组(Z)10只,厄贝沙坦组(E)IO只。中药组给予活血化瘀通络中药

5、配方颗粒3.929/kg/d灌胃,厄贝沙坦组给予厄贝沙坦24mg/kg/d灌胃,正常组及模型组给予等体积纯净水灌胃,每日一次,共16周。于用药第16周末,收集24h尿液并记录尿量测定尿蛋白排泄量(UAE);禁食12h后,麻醉状态下称量体重;腹主动脉取血,分离血清,测定糖化血红蛋白(I-IbAlc)、血清白蛋f兰t(ALB)、血肌酐(Cr)浓度;摘取右肾,去被膜后称重以计算肥大指数呷),切取部分肾皮质组织在光镜和电镜下观察肾脏病理改变,免疫组化法观察肾脏VEGF的表达;摘取左肾,去被膜后切取部分肾皮质组织放入冻存管,置于液氮中冻存

6、,用westernblot和Real-timePCR的方法检测肾脏VEGF的表达水平。结果:l实验大鼠的一般状况比较正常组大鼠精神良好,反应敏捷,眼睛有神,肌肉丰满,皮毛光泽柔顺,尾不弯曲,无畸形,饮食正常,粪便呈麦粒状,尿量正常。造模组大中文摘要鼠均出现明显的多饮、多食、多尿症状,体重相对正常组减轻,并逐渐出现精神萎靡,卷曲拱背,毛色晦暗,尾巴苍白,少动抱团。在注射STZ第8周开始出现多种糖尿病并发症,如白内障、溃疡、颌下及腋部包块等,上述症状以模型组最为显著。在第16周时两治疗组大鼠一般情况较模型组为好。在实验过程中,不同阶

7、段有大鼠死亡情况。注射STZ后72小时之内,2只大鼠死亡,5只大鼠血糖未达标准,原因可能与大鼠个体差异和操作有关,予以剔除。在治疗期间,模型组死亡4只,中药组和厄贝沙坦组大鼠各死亡2只,死亡原因可能为高血糖引起机体代谢紊乱,最终导致各脏器功能衰竭而死亡。2各组大鼠体重,右肾重,肥大指数(右肾重/体重)的比较与正常组相比,模型组和两治疗组的体重明显减轻(尸O.05),两治疗组之间体重无明显差异(P>O.05);右肾重各组间均没有明显差异(尸>O.05):与正常组相比,模型组和

8、两治疗组肥大指数明显升高(尸0.05)。3各组大鼠生化指标的比较3.1各组大鼠24h尿蛋白定量的比较与正常组相比,模型组及两治疗组24h尿蛋白定量均明显升高

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