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时间:2018-07-08
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1、通络方剂对糖尿病大鼠体内抗氧化系统的影响及对胸主动脉血管内皮的保护作用*论文.freelandaortathoracicaendotheliaindiateticrats.MethodsThediabeticratsofSTZ-inducedaSOD,CAT,T-AOC,MDAandGSHeasured.Thepathologicchangesoftheaorticthoracicendotheliaicroscopy.ResultsparedalcontrolgrouptheplasmaactivityofSODandGSHreducedsignificantlyintheotherthre
2、egroups(P0.05).PlasmalevelofMADinpositivecontrolgroupincreasedsignificantly.TheplasmaactivityofSODandGSHalevelsofT-AOCandCATalsoroseinTongluofangjigroupprovetheantioxidativeability,inhibitlipidperoxideandprotecttheaortathoracicaendotheliaindiabeticrats,andfurtherproveddiabeticangiopathybelongstoLuob
3、ing.Tongluofangjientofthediabeticchronicplication.【Keya公司,通络方剂超微颗粒由人参、水蛭、全蝎、蜈蚣、土鳖虫、赤芍等药物组成,由以岭药业提供。超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽(GSH)、脂质过氧化物的产物丙二醛(MDA)、总抗氧化能力(T-AOC)测定试剂盒购自南京建成公司,血糖测定采用罗氏公司血糖测定仪。雄性SD大鼠(体重160~180g),购自上海中科院实验动物中心。1.2DM大鼠模型的制备与处理大鼠适应性饲养5天,禁食18h后先按体重随机分为两组,一组(15只)大鼠单次腹腔注射STZ60mg/kg诱发糖尿病,
4、另一组(5只)大鼠同时腹腔注射等体积的上述缓冲液作为对照。注射STZ的大鼠于注射3天后,空腹血糖持续高于16.7mmol/L,尿糖呈强阳性的大鼠确定为糖尿病大鼠。再将糖尿病大鼠随机分为3组,加正常对照组共4组:正常对照组(N)、少量胰岛素处理的阳性对照组(D)、通络方剂处理的糖尿病组(T)和褪黑素处理的糖尿病组(M),并开始给药处理。通络方剂组每天上午灌服通络方剂水溶液1g/kg,褪黑素组每天上午灌服褪黑素溶液5mg/kg,其余两组均灌服等体积稀释液,连续处理6周。动物自由进食饮水,每周测量体重。实验结束前大鼠过夜禁食后乙醚麻醉下摘除眼球取血留取血清,迅速打开胸腔找到胸主动脉,剪断后取出滴注4
5、%戊二醛缓冲液同时顺血管纵轴切成0.5cm×0.5cm小片,并立即置于戊二醛固定。1.3指标检测方法测血糖采用葡萄糖氧化酶法。血清标本用可见光法检测CAT活性;用TBA法测定MDA,用DTNB法定量测定GSH含量;比色法测SOD活性与总抗氧化能力。1.4统计学方法实验数据采用(x±s)表示,各组间数据显著性检验均采用不配对t检验处理。2结果2.1一般情况造模组注射STZ后1~2天出现多饮、多尿,第3~4天多食明显。通络方剂处理组及模型对照组大鼠多饮多尿症状较重,精神萎靡、毛发凌乱暗淡易脱,体重下降。见表1。表1各组大鼠体重、血糖(x±s)注:*P0.05,各模型组大鼠血糖较正常对照组升高,差异
6、有显著性2.2通络方剂对糖尿病大鼠血糖的影响见图1。图1各组糖尿病大鼠血糖2.3通络方剂对糖尿病大鼠抗氧化系统的影响见表2。表2各组血清T-AOC、SOD、GSH、CAT、MDA活性比较(U/ml,x±s)注:**vsN组P0.01,*vsD组P0.05与N组相比,各模型组SOD、GSH水平明显降低,差异有显著性(P0.01);T-AOC与CAT也明显降低,差异亦有统计学意义(P0.05)。与D组相比,T、M组SOD、GSH水平显著增加(P0.05),但T、M组之间差异无显著性。各模型组大鼠之间血清T-AOC及CAT活性差异均无显著性。2.4通络方剂对糖尿病大鼠胸主动脉血管内皮的影响胸主动脉扫
7、描电镜观察到正常大鼠内皮细胞呈长多边形,宽约10~15μm,长约20~40μm,核位于细胞中央,微突,内皮表面光滑。相邻细胞间连接紧密,为连续型内皮。高倍镜下可见细胞表面有细小指状、瓣状突起,相邻细胞间的指状突起相互交错连接。模型组大鼠内皮细胞肿胀,细胞排列紊乱,细胞向血管腔突起至内皮表面凸凹不平,相邻细胞间不再呈紧密连接,内皮通透性增高,细胞表面粗糙,血管内皮细胞的细胞膜有破损指状突起减少或消失
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