盐酸小檗碱对糖尿病大鼠胸主动脉内皮损伤的保护作用

《盐酸小檗碱对糖尿病大鼠胸主动脉内皮损伤的保护作用》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、盐酸小檗碱对糖尿病大鼠胸主动脉内皮损伤的保护作用作者：张卓王春梅王春艳白岩王丽杰徐嘉琪陈立【摘要】　　目的探讨盐酸小檗碱对2型糖尿病血管内皮功能损伤的保护作用。方法采用小剂量链脲佐菌素腹腔注射加高脂饲料喂养的方法建立2型糖尿病大鼠模型。将模型动物随机分为模型组、盐酸小檗碱组，另设正常对照组以及正常盐酸小檗碱组。用药组灌胃给药8NOlevel,SODactivityandeNOSexpressionsofaortaintype2diabeticratsinducedbyhighfatdietplusSTZandexplo

2、rethemechanismunderlyingprotectiveeffectofberberineonendothelialdysfunction.Methods)血管内皮功能损伤的保护作用。　　1材料与方法　　1.1动物及饲料　　选用健康清洁级雄性odel550，为BioRad公司产品。755B型紫外可见分光光度计，系上海精密科学仪器有限公司分析仪器总厂产品；台式高速低温离心机，美国索福公司产品；1261型γ放射免疫计数仪，LKB公司产品。　　1.4T2DM动物模型的建立及分组〔4〕　　60只大鼠模型，以高脂饲

3、料喂养。大鼠高脂饲料喂养4g/kg）2次，间隔1mol/L作为判断模型成功的标准。将制备成功的T2DM大鼠26只随机分为糖尿病模型组（T2DM）和盐酸小檗碱治疗组（T2DM+BER）。T2DM+BER组和CON+BER组以盐酸小檗碱100mg·kg-1·d-1连续灌胃8g/kg）腹腔注射麻醉，腹主动脉取血并处死动物。每只大鼠约可以取血4～5ml，分离血清，分装入Eppendorf管，-70℃冻存，用于检测FPG、TG、TC和FINS。FPG、TG和TC采用酶学方法检测。FINS由吉林大学第三医院核医学科采用放免法检测。

4、　　1.6葡萄糖耐量实验　　葡萄糖耐量实验进行前，大鼠禁食12～16h，自由饮水，腹腔注40%葡萄糖（2g/kg体重），在葡萄糖注射前、注射后30、60、120min断尾取血，3500r/min离心15min，吸取血清。随后按照试剂盒说明书，利用葡萄糖氧化法测定血清中葡萄糖含量。　　1.7血清中NO和SOD的检测　　分别按照NO和SOD试剂盒说明书方法测定血清中NO及SOD的含量。　　1.8免疫组化方法检测大鼠胸主动脉组织eNOS蛋白表达　　切片常规用二甲苯脱蜡，经各级乙醇至水洗。抗原热修复，已修复切片恢复室温；PBS

5、洗3次，每次3min；滴加正常山羊血清封闭液，室温20min。滴加一抗(1∶150)，4℃过夜；PBS洗3次，滴加生物素化二抗，室温20min；PBS洗3次，滴加HRP链霉卵白素，室温20min；DAB显色。苏木精复染2min、盐酸乙醇分化；脱水、透明、中性树胶封片。阴性对照用PBS代替一抗。于显微镜400倍下观察细胞质出现棕色或棕黄色颗粒者为阳性,不显色者为阴性。　　1.9统计学方法　　实验数据用x±s表示，统计分析采用SPSS13.0软件处理，多组间比较用单因素方差分析(One组大鼠精神萎靡、毛发稀落欠光泽，糖尿

6、病症状较重，与其他3组相比，体重略有升高，但无统计学差异(P>0.05)。T2DM+BER组大鼠经灌胃治疗8.　　2.2盐酸小檗碱对大鼠腹腔注射葡萄糖耐量的影响　　如图1所示，CON组、CON+BER组及T2DM+BER组在葡萄糖注射后30min血糖达峰值，在90min内逐渐下降；而T2DM组血糖在60min达峰值，后缓慢下降，T2DM组血糖水平与CON组相比一直维持在较高水平。结果表明T2DM大鼠对葡萄糖耐受力下降，出现IR，而盐酸小檗碱可明显提高机体对葡萄糖的耐受量，改善了IR。　　2.3盐酸小檗碱对血清NO

7、含量和SOD活性的影响　　与CON组比较，T2DM组血清NO含量及SOD活性明显降低(P＜0.01)，盐酸小檗碱治疗8JManagCare，2003；9(3Suppl):S63S80.　　2JeongaK，MonicaM，Kolecularandpathophysiologicalmechanisms〔J〕.Circulation，2006；113：1888904.　　3ZhangY，LiX，ZouD,etal.Treatmentoftype2diabetesanddyslipidemiaultipleloodel

8、〔J〕.ExpDiabetesRes,2008；70：405.　　5BrandesRP，Schmitz,etal.AnendotheliumderivedhyperpolarizingfactordistinctfromNOandprostacyclinisamajorendotheliumdependentvasodil