枇杷果实品质分析及ccd1基因克隆与表达研究

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1、QualityanalysisandCCD1genecloningandexpressionofloquat(Eriobotryajaponica)fruitByChengbangLiangSupervisedbyAssociateProfessorChunhuaZhouADissertationSubmittedtoHorticultureandPlantProtectionCollege，YangzhouUniversityInPartialFulfillmentoftheRequirementsforT

2、heMasterDegreeofAgriculturalScienceMay2013梁乘榜：枇杷果实品质分析及CCDl基因克隆与表达研究1枇杷(EriobotryajaponicaLindl)为原产我国的常绿果树，按照果肉颜色不同可分为红沙和白沙两大类。枇杷果实色泽艳丽，果肉柔软多汁，营养丰富，目前关于其品质的研究以糖酸代谢、类胡萝b素积累为主，而关于香气的研究较少。本研究以枇杷果实为试材，在分析测定基础品质指标、色泽指标的基础上，对不同品种枇杷成熟果实及不同发育期果实果肉香气进行分析，并进行枇杷果实CCDl

3、基因克隆和表达研究，主要研究结果如下：l、对2011年采集的3个红沙和12个白沙品种枇杷成熟期果实的品质进行检测，结果显示“大五星”单果重和纵横径平均值最大，最小的是“冰糖种”；红沙品种可溶性固形物普遍比白沙品种低，其中“鸡蛋白”含量最高，“大五星”含量最低。2012年采集的发育过程中的果实样品测试数据显示出5月4日“金丰一号"和“冠玉”同时进入快速发育期，果实重量和纵横径在成熟前1．2周就达到了品种固有大小，成熟的“金丰一号”平均值为37．75g，“冠玉”果实平均值达到39．96g。色差分析显示红沙品种果皮

4、和果肉明亮度均低于白沙品种，颜色更接近于黄色。果实芳香成分GC．MS检测分析结果表明，15个枇杷品种均以醇类平均含量最高，其次是醛类，红沙和白沙品种醇类含量平均值分别达到47．7％和53．63％，在较普遍存在的物质中反式．2．异氰基环己醇和苯甲醛为红沙和白沙枇杷共有。“金丰一号”和“冠玉”果实发育过程中分别检测到24种和32种香气物质，“金丰一号”7个时期样品中平均含量最高的是醛类，其次是酸类和醇类，分别为0．937P,g·g～、0．304gg·g～、O．163p,g·g～；不同时期共有的成分是己醛，其次存在

5、较普遍的是苯甲醛和2．己烯醛；“冠玉”不同发育时期样品中也是醛类总含量最高，醇类次之，以苯甲醛和2．己烯醛最为普遍存在，其中2．己烯醛的平均含量最高，苯甲醛次之；两品种果实中醛类和醇类总含量最大值同在4月19日样品中出现，反式．2．己烯．1．醇和正己醇最为普遍存在。2、克隆获得枇杷CCDl基因全长，命名为EjCCDl，该eDNA全长1735bp，有一个完整的1518bp的开放阅读框，编码由506个氨基酸组成的蛋白质，GenBank登录号为JQ317781；此外，克隆得到枇杷CCD4基因3’端片段，命名为EjC

6、CD4，该eDNA片段长1405bp，包含一个1308bp的开放阅读框，可编码436个氨基酸组成的蛋白质片段，GenBank登录号为JQ317782。采用实时荧光定量PCR进行“金丰一号”和“冠玉”枇杷不同发育时期果肉EjCCDl表达分析，结果显示不同发育阶段的表达量有很大差异，同一时期不同品种果实间的表达量也有很大差异，但均以2012年5月25日样品中表达量最高。关键词：枇杷；芳香物质；营养品质；基因克隆；基因表达扬州大学硕士学位论文AbstractLoquat(EriobotryajaponicaLind

7、l)isanativeevergreenfruittreeofChina,andcanbedividedintoHongshaandBaishared-andwhite-fleshedcategories(alsocalledred—andwhite—fleshedcategories)．Loquatfruitcolorisgorgeous，thefleshissoftandjuicyandrichinnutrition．Researchesaboutthequalityofloquatfruitaremai

8、nlyfocusedonsugarandacidmetabolism，carotenoidaccumulation，buttherearefewonthearoma．Inthisstudy,loquatfruitswereusedasmaterials，theflesharomaofdifferentcultivarsanddifferentdevelopmentalstageswereanalyz