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时间:2019-03-05
《抗pd-l1抗体对脓毒症肝损伤小鼠的治疗作用及机制研究》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在学术论文-天天文库。
1、第二军医大学硕士学位论文抗PD.L1抗体对脓毒症肝损伤小鼠的治疗作用及机制研究EffectofAnti--PD--L1AntibodyonLiverFunctioninMicewithExperimentalSepsis研究生:学科与专业:研究方向:指导老师:培养单位:导师组成员:朱玮珉麻醉学脓毒症与天然免疫邓小明教授第二军医大学第一附属医院李金宝副教授张燕副研究员马宇副教授二。一三年五月划生声明\『恻㈣本人声明所呈交的学位论文是我个人在导师指导下进行的研究工作。除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包
2、含其他人已经发表或撰写过的研究成果。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。本人承担本声明的法律责任。学位论文作者签名菇讳纨日期:.2,侈年歹月√日学位论文版权使用授权声明本人完全了解第二军医大学有关保留、使用学位论文的规定,第二军医大学有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版,允许论文被查阅和借阅。本人授权第二军医大学可以将学位论文全文或部分内容编入《中国学位论文全文数据库》、《中国优秀博硕士学位论文全文数据库》等数据库进行检索。可以采用影印、缩印或扫描等
3、复制手段保存、汇编学位论文。(保密的学位论文在解密后适用本授权书)学位论文作者签名乓越册纪导师签名:日期:0。哆年f月硝日,日期:/,了年f月彳目录中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一l英文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯。3缩略词表⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯5前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯。7日}J舌⋯⋯...⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯
4、⋯⋯⋯⋯⋯.一⋯⋯..,实验研究⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯ll第一部分脓毒症小鼠肝脏实质细胞中PD.L1的表达材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯11结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..16讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.j⋯⋯⋯⋯⋯⋯18第二部分抗PD.L1抗体对脓毒症小鼠肝脏损伤的保护作用材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..2l结果⋯⋯⋯⋯
5、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯。25讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..29全文总结⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯32参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯33文献综述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..37在读期间发表论文及科研工作⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯45致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯47
6、抗PD-L1抗体对脓毒症小鼠肝功能保护作用的研究摘要【研究目的】本实验旨在研究盲肠结扎穿孔(cecalligationandpuncture,CLP)脓毒症小鼠肝脏PD.L1分子的表达变化;探索应用抗PD.L1抗体治疗对脓毒症小鼠是否具有肝治疗作用,并检测其对肝脏内细胞因子表达的影响,以此探求其在脓毒症肝损伤中的作用,为脓毒症肝功能保护性的治疗提供新的实验依据。【研究方法】l、将16只C57BL/6小鼠随机分为假手术组(Sham,n=8)、CLP组(CLP,n=8),采用CLP术致脓毒症模型。于手术后24h取
7、小鼠肝脏,分离左叶、右叶。左叶切割为约1.5em×1.5cmx1em大小后,立即行组织冰冻包埋,于冰冻切片机上行切片(厚度5pxn)。切片经固定后行抗PD.L1的免疫组织化学染色,抗体标记物为辣根过氧化物酶(horseradishperoxidase,HRP)。显微镜下观察并分析两组切片中PD.L1表达水平。右叶切割出1cm×1cm大小,经匀浆后提取RNA,经反转录后行Q.RT-PCR,定量检测肝组织中PD.L1的mRNA表达水平。2、将32只C57BL/6小鼠随机分为假手术组(Sham,n=8)、CLP组(
8、CLEn-8)、同型对照组(Isotype,n_8)和抗PD—L1组(Anti.PD.L1,n=8),除假手术组外其余小鼠均行CLP术,同型对照组和抗PD.L1组于CLP术后1h分别经腹腔给予同型对照抗体或抗PD.L1抗体(50肛g/200m,每只)。手术24h后取小鼠心脏血检测丙氨酸氨基转移酶(alanineaminotmnsferase,剐LT)和天冬氨酸氨基转移酶(aspartateamino
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