左归丸对庆大霉素诱导耳肾损伤大鼠模型jnkc-jun通路的影响及机制

左归丸对庆大霉素诱导耳肾损伤大鼠模型jnkc-jun通路的影响及机制

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时间:2019-03-05

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1、湖北中医药大学学位论文原创性声明本人声明:所呈交的学位论文是在导师的指导下进行的研究工作及取得的研究成果。除了论文中特别加以标注和致谢的地方外,本论文不包含其他个人或集体已经发表或撰写过的研究成果,也不包含为获得湖北中医药大学或其他单位的学位或证书而使用过的材料。对本文的研究做出贡献的个人和集体,均已在论文中作了明确的说明。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。学位论文作者签名:舻修勋力溶日关于学位论文使用授权的声明本人完全了解湖北中医药大学有关保留、使用学位论文的规定,即:学校有权保留学位论文,允许学位论文被查阅和借阅;学校可以公布学位论文的全部或部份内容,可以采用复

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3、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯7讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯8结论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..11第二部分左归丸对庆大霉素诱导耳肾损伤模型的保护作用⋯⋯..12材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..12结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..16讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..19结论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..23第三部分左归丸对庆大霉素诱导耳肾损伤模型JNK/c—Jun通路的影响及机制⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..24材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..24结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..35讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

4、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..42结论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..48结语⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..49参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯5O附录⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..59附一文献综述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.59综述一⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..59参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.66综述二⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..68参考文献..⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..74附二实验图片⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.79附三博士在读期间发表文章⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.94致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..

5、95中文摘要目的:探讨左归丸对庆大霉素诱导耳肾损伤大鼠模型JNK通路的影响及机制。方法:(1)将12只SPF级雄性Wistar大鼠适应性喂养1周后,随机分为空白对照组、庆大霉素组。每组6只。空白对照组腹腔注射生理盐水2.5ml·kg~·d~,庆大霉素组腹腔注射硫酸庆大霉素100mg·kg~·d~。每日根据体重调整给药剂量。2组大鼠连续给药10d。分别在给药前和给药后检测大鼠听力ABR阈值、尿NAG酶值,在实验结束取耳蜗和肾脏标本进行HE染色,在光镜下观察耳蜗和肾脏病理变化。(2)将18只SPF级Wistar大鼠适应性喂养1周后随机分为3组:空白对照组,模型组和左归丸组。每组

6、6只。空白对照组腹腔注射生理盐水2.5ml·kg‘1·d~,模型组腹腔注射硫酸庆大霉素100mg·kg一·d~,左归丸组腹腔注射硫酸庆大霉素100mg·kg一·d‘1和灌胃左归丸水溶液109-kg~·d~。每日根据体重调整给药剂量。3组大鼠连续给药10d。分别在给药前和给药后检测大鼠听力ABR阈值、尿NAG酶值、大鼠体重变化。实验结束后,测量大鼠肾脏指数,留取血液检测Scr、BUN。留取耳蜗和肾脏标本光镜和电镜下观察病理变化。(3)将72只SPF级Wistar大鼠适应性喂养1周后随机分为4组:空白对照组,模型组、SP600125组和左归丸组。每组18只。空白对照组腹腔注射生

7、理盐水2.5ml·kg一·d~;模型组腹腔注射硫酸庆大霉素100mg·kgq·d-J;SP600125组左侧腹腔注射硫酸庆大霉素100mg·kg~·d~,2h后右侧腹腔注射SP60012515mg·kg~·d-l;左归丸组腹腔注射硫酸庆大霉素100mg·kg~·d。1和灌胃左归丸水溶液109·kg~·d一。每日根据体重调整给药剂量。4组大鼠连续给药10d。实验结束后,留取耳蜗和肾脏标本,以免疫组化方法、免疫印迹杂交方法、实时定量PCR方法检测JNK、p-JNK、c-Jun的表达和蛋白、基因的含量。结果:(I)庆大霉

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