bax-抑制肽对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤神经细胞保护作用

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1、Bax一抑制肽对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤神经细胞保护作用摘要目的通过检测应用gax一抑制肽对新生鼠缺血缺氧性脑损伤后神经细胞凋亡的疗效，探讨Bax一抑制肽对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤的神经保护作用。方法选取200只7日龄新生wjster大鼠为研究对象，随机分为以下三组：假手术组；对照组；实验组(bax一抑制肽)。对照组与实验组分别通过结扎左侧颈总动脉以及置于8％的氮氧混合气中2小时建立新生鼠缺氧缺血性脑损伤(HIBD)模型，假手术组仅游离左侧颈总动脉，不结扎，不低氧处理。实验组于建立模型后0h、6h、12h、24h、48h、3d不同时问点侧脑室注射bax-抑制肽5ug(5u1)，其余两组予相同剂

2、量生理盐水于相同时间点侧脑室注射。对照组和假手术组于HIBD模型建立后第12h、24h、2d、3d、7d及实验组HIBD后第7d每组取2只甲醛灌注后断头取脑海马组织病理检测，另取6只新鲜脑组织进行蛋白免疫印迹法(Westonblot)检测活性Caspase一3蛋白、逆转录PCR(RT—PCR)测定Caspase-3mRNA的表达。结果l、HE染色组织显示：在患侧海马区，实验组及对照组oh、6h、12h、24h、48h各亚组均有病理性损伤，实验组病理损伤程度低于对照组，在72h亚组实验组与对照组病理损伤无明显差异。2、Westernblot检测Caspase一3蛋白及RT—PCR检测Caspas

3、e一3mRNA：对照组与假手术组比较，对照组在HIBD后oh、6h、12h、24h海马区Caspase一3及mRNA依次增多，24h达高峰，48h开始下降，7d时达到基础水平。3、HIBD后7dWesternblot检测Caspase-3：实验组与对照组在0h、6h、12h、24h、48h各亚组比较，海马区Caspase一3明显减少，差异有统计学意义；在72h亚组比较差异无统计学意义。实验组各亚组间比较，HIBD后越早注射bax一抑制肽，Caspase一3越少，差异有统计学意义。4、HIBD后7dRT—PeR检测Caspase一3mRNA：实验组和对照组在0h、6h、12h、24h、48h各亚

4、组比较，患侧海马区活性Caspase一3明显减少，差异有统计学意义；在72h亚组比较差异无统计学意义。实验组各亚组间比较，HIBD后越早注射bax一抑制肽，Caspase一3mRNA量越少，差异有统计学意义。结论：1、新生大鼠缺氧缺血脑组织Caspase一3及mRNA表达增多，神经细胞凋亡增加，24小时达高峰，48小时后逐渐下降。2、HIBD后2天内侧脑室注射bax一抑制肽可减少Caspase一3及mRNA的表达，减轻神经细胞凋亡。3、在HIBD后越早给予bax-抑制剂治疗，神经保护作用越明显，缺氧缺血后2天内为有效治疗时间窗。硕士研究生张辉(儿科学专业)指导教师姜红教授关键词：bax-抑制肽

5、；缺氧缺血；脑；新生儿；Caspase一3NeuroprotectiVeEffectofBax—InhibitingPeptideonNewbronRatswithNeonatalHypoxicIschemicDamageAbstractobjective：ToinvestigatetheeffectsofBax—inhibitorypeptideonimprovingneuronalapoptosisinnewbornratswithhypoxia—ischemicbraindamage(HIBD)．Method：Twohundred7-day—oldnewbornwisterratswer

6、erandomlydividedintothreegroups：Shamoperationgroup，controlgroup，experimentgroup．HIEmodelwasestablishedbyligationoftheleftcarotidarteryalongwith2h8％oxygenexposureinneonatalratsofthecontrolandexperimentgroups．Theshamoperationgroupwasnotsubjectedtohypoxia—ischemia．111eexperimentgroupreceivedanintracere

7、broventricularinjectionofbax—inhibitorypeptidewithdoseof5ug(5u1)respectivelyinoh，6h，12h，24h，48hand3dafterHIBD，whiletheothertwogroupsreceivednormalsalineatthesametime．Eachgroupofmiceweresacrificed，onth