batf、rorγt及il-17在哮喘小鼠脾组织中的表达及其意义

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1、中图分类号：R562.2硕士学位论文BATF、RORγt及IL-17在哮喘小鼠脾组织中的表达及其意义院（系）、所临床医学院研究生姓名魏海霞学科、专业内科学导师姓名范贤明教授项目来源：四川省卫生厅（项目编号120328）二Ο一三年四月目录1BATF、RORγt及IL-17在哮喘小鼠脾组织中的表达及其意义………………………………………………………11.1中文摘要………………………………………………………11.2英文摘要………………………………………………………41.3前言……………………………………………………………

2、91.4材料与方法……………………………………………………141.5结果……………………………………………………………221.6讨论……………………………………………………………291.7结论……………………………………………………………341.8参考文献………………………………………………………351.9英汉缩略词对照表……………………………………………402致谢……………………………………………………………413Th17细胞与激素抵抗型哮喘（综述）………………………42BATF、RORγt及IL-17在哮喘小

3、鼠脾组织中的表达及其意义摘要目的：观察B细胞活化转录因子（B-cellactivitingtranscriptionfactor,BATF）、维甲酸相关孤核受体（retinoicacid-relatedorphanrecepptorγt，RORγt）、白细胞介素-17（interleukin-17，IL-17）在哮喘小鼠脾脏组织中的表达，探讨BATF在哮喘发病机制中的作用，为哮喘治疗寻找新途径。方法：取健康雌性BALB/c小鼠15只，随机分为正常对照（NS）组、哮喘（AS）组、地塞米松（DXM）组，每组小鼠均为5

4、只。AS组、DXM组小鼠分别于第0、7、14天用卵清蛋白(OVA)100μg与氢氧化铝（Al（OH）3）1mg混合的生理盐水混悬液0.2ml腹腔内注射致敏，NS组则用等量生理盐水代替行腹腔注射；第21天开始NS组予以生理盐水，AS组及DXM组予1%的OVA生理盐水溶液行超声雾化吸入，每天1次，每次40分钟，连续5天进行激发；DXM组于每次激发前30分钟，予地塞米松磷酸钠注射液1.0mg/kg腹腔注射，NS组及AS组则予以等量的生理盐水腹腔注射，时间同上。所有小鼠都于末次激发24小时后处死。收集支气管肺泡灌洗液（B

5、ALF）行白细胞计数及分类计数；肺组织病理切片HE染色来评估小鼠气道及肺组织炎性细胞浸润情况；酶联免疫吸附法(ELISA)检测脾脏组织匀浆IL-17的浓度；real-timePCR法检测脾脏组织中BATFmRNA、RORγtmRNA的表达水平。结果：（1）肺组织病理学HE染色：AS组可见小气道及小血管周围大量的炎性细1胞浸润，粘膜及粘膜下层水肿，肺泡腔内可见嗜酸性粒细胞、中性粒细胞、单核细胞及溢出的红细胞；DXM组炎细胞、渗出物较AS组少，支气管上皮基本完整，可见明显的炎症吸收；NS组小气道粘膜无明显水肿，管腔光

6、滑、无闭塞，周围小血管基本未见炎性细胞的浸润。（2）与NS组比较，AS组、DXM组小鼠BALF中白细胞总数、中性粒细胞数和嗜酸性粒细胞数明显增多(P＜0.05),与AS组比较，DXM组BALF中白细胞总数、中性粒细胞数和嗜酸性粒细胞数有明显降低(P＜0．05)。（3）脾脏组织匀浆IL-17的浓度：AS组IL-17浓度最高，DXM组其次，NS组最低，三组之间的差异有统计学意义（P＜0.05），且与NS组比较，AS组及DXM组IL-17浓度均明显增高，差异有统计学意义（P＜0.05），DXM组较AS组IL-17浓度降

7、低，差异有统计学意义（P＜0.05）。（4）脾脏组织中BATFmRNA、RORγtmRNA表达水平：AS组水平最高，DXM组其次，NS组最低，三组之间的差异有统计学意义（P＜0.05），且与NS组比较，AS组及DXM组BATFmRNA、RORγtmRNA表达水平均明显增高，差异有统计学意义（P＜0.05），DXM组较AS组BATFmRNA、RORγtmRNA表达水平降低，差异有统计学意义（P＜0.05）。（5）相关分析表明：脾脏组织中IL-17的浓度与BALF中白细胞总数、中性粒细胞数、嗜酸性粒细胞数成正相关（r

8、=0.838,0.737，0.882,P均＜0.005）；脾脏组织BATFmRNA的表达量与RORγtmRNA表达量、脾组织匀浆IL-17浓度呈正相关（r=0.807,0.833,P均＜0.005）；脾组织匀浆IL-17浓度与脾脏组织RORγtmRNA表达量呈正相关，（r=0.890,P＜0.005）。结论：（1）BATF2与RORγt共同调节IL-17的分泌，并通过IL