人体细胞体外重编程为诱导性多能干细胞关键技术的研究

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1、分类号：R541.4学校代码：10392学科专业代码:100102学号：2101002320福建医科大学硕士研究生毕业论文人体细胞体外重编程为诱导性多能干细胞关键技术的研究Thekeytechnologystudyofreprogramminghumancellsintoinducedpluripotentstemcellsinvitro学位类型：医学硕士所在学院：福建医科大学基础医学院研究生：韩升霞学科、专业：免疫学导师：沈晓丽教授研究起止日期：2011年09月至2012年12月答辩日期：2013

2、年06月04日二○一三年六月12目录中英文简写对照……………………………………………………………………4中文摘要……………………………………………………………………………5英文摘要……………………………………………………………………………7前言…………………………………………………………………………………9第一部分人包皮成纤维细胞体外诱导为多能干细胞实验目的、材料与方法……………………………………………………………12实验结果……………………………………………………………………………16讨论…………

3、………………………………………………………………………18第二部分人脐静脉内皮细胞原代培养及体外诱导为多能干细胞的实验研究第一章人脐静脉内皮细胞的原代培养实验目的、材料与方法……………………………………………………20实验结果……………………………………………………………………23讨论…………………………………………………………………………25第二章人脐静脉内皮细胞体外诱导为多能干细胞的实验研究第一节表达绿色荧光蛋白基因的慢病毒颗粒感染人脐静脉内皮细胞的实验研究实验目的、材料与方法………………………

4、……………………………26实验结果……………………………………………………………………27讨论…………………………………………………………………………29第二节microRNA(miR-302-367）慢病毒颗粒感染人脐静脉内皮细胞的实验研究3实验目的、材料与方法………………………………………………………31实验结果………………………………………………………………………32讨论……………………………………………………………………………33结论……………………………………………………………………………

5、35参考文献………………………………………………………………………37致谢……………………………………………………………………………41综述……………………………………………………………………………42综述参考文献…………………………………………………………………474中英文简写对照hPFFhumanpostnatalforeskinfibroblasts人包皮成纤维细胞HUVEhumanumbilicalveinendothelialcells人脐静脉内皮细胞ESCEmbryonicstemcel

6、l胚胎干细胞TSCTotipotentstemcell全能干细胞iPSCinducedpluripotentstemcell诱导性多能干细胞SABCStreptactividin-biotincomplex链酶亲和素-生物素-过氧化物酶复合法MTS3-（4,5-Diemthylthiazol-2-yl）-2,5-四甲基偶氮唑盐微量酶diphenyltetrazoliumbromide反应比色法LVLentivirus慢病毒GFPGreenfluoreseentProtein绿色荧光蛋白MOIMult

7、iplicityofinfection感染复数MEFsMouseembryonicfibroblasts小鼠胚胎成纤维细胞FBSFetalbovineserum胎牛血清PBSPhosphatebuffersolution磷酸盐缓冲液DAB3，3’-diaminobenzidine二氨基联苯胺DMSODimethylsulfoxide二甲基亚砜bFGFbasicfibroblastgrowthfactor碱性成纤维细胞生长因子5人体细胞体外重编程为诱导性多能干细胞关键技术的研究中文摘要目的本研究将携带

8、胚胎特异性转录因子Oct4、Sox2、c-Myc、Klf4基因慢病毒颗粒感染人包皮成纤维细胞（humanpostnatalforeskinfibroblastshPFF），体外重编程为诱导性多能干细胞（inducedpluripotentstemcelliPSC）；原代培养人脐静脉内皮细胞（humanumbilicalveinendothelialcells，HUVE）体系,将表达microRNA-302-367基因慢病毒颗粒感染HUVE，探讨目的基因microRNA