α-硫辛酸对高糖培养的人视网膜色素上皮细胞氧化应激以及分泌vegf与pedf的影响

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1、目录中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·l英文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯4研究论文Q．硫辛酸对高糖培养的人视网膜色素上皮细胞氧化应激以及分泌VEGF与PEDF的影响前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯8刖f舌⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯8材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯“9结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·18附图⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

2、⋯·19附表⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·21讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·23结论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·28参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯29综述糖尿病视网膜病变发生机制中VEGF与PEDF的研究进展⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯··32致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·41个人简历⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯42中

3、文摘要泓硫辛酸对高糖培养的人视网膜色素上皮细胞氧化应激以及分泌VEGF与PEDF的影响摘要目的：糖尿病(diabetesmellitus，DM)是一种I临床常见的慢性疾病。随着人们物质生活水平的提高，以营养过剩、缺乏运动与超重肥胖为主要特征的不健康生活方式日益流行，DM的发病率和死亡率逐年上升。DM已成为继心血管疾病和癌症之后人类的第三大死亡原因。糖尿病视网膜病变(diabeticretinopathy，DR)是DM最常见的慢性微血管并发症之一，每年造成的失明患者超过10，000人。DR的发病机制复杂，尚未完全阐明。近年来许多研究认为，氧化应激反

4、应是糖尿病慢性并发症发生发展的共同通路。高糖状态下机体氧化与抗氧化防御系统失衡，氧自由基清除能力下降，氧化应激产物堆积，损伤组织和细胞。视网膜组织含有丰富的多不饱和脂肪酸，对血液中氧分子的摄取量最高，对于氧化应激反应也更加敏感。DR的基本病理改变是血．视网膜屏障破坏，新生血管和纤维生成。新生血管的发生发展是临床面临的难题，后期可引起玻璃体积血和牵拉性视网膜脱离，严重影响视力甚至导致失明。血管内皮生长因子(vascularendothelialgrowthfactor，VEGF)和色素上皮衍生因子(pigmentepithelium．derived

5、factor,PEDF)分别作为主要的血管刺激因子与血管抑制因子，其二者间的平衡调节对于新生血管形成是至关重要的。已有文献指出，高糖可导致视网膜色素上皮(retinalpigmentepithelial，RPE)细胞分泌的ⅦGF和PEDF表达量发生改变以及促进RPE细胞增生。随着氧化应激和细胞因子学说在DR发病机制中的探索，寻找安全有效的抗氧化药物，恢复血管刺激因子与抑制因子之间的平衡状态，对于提高患者的生活质量有重要意义。硫辛酸0ipoicacid，LA)富含于多种食物中，是应用广泛作用强大的抗氧化剂。本实验应用不同浓度的0【．硫辛酸(alph

6、alipoicacid，0【．LA)作用于高糖体外培养人视网膜色素上皮(humanretinalpigmentepithelial，HRPE)细胞48小时，观察HRPE细胞形态、活力、氧化应激水平以及VEGF、PEDF分泌含量的变化，以研究仅一LA对高糖环境下HRPE细胞的保护作用并进一步探讨该药治疗DR的可能作用机制。中文摘要方法：体外培养HRPE细胞，随机分为7组：(1)正常对照组(葡萄糖浓度：5．56mmol／L)；(2)高糖组(葡萄糖浓度：30mmol／L)；(3)高渗对照组(5．56mmol／L葡萄糖+24．44mmol／L甘露醇)；(

7、4)高糖+et．LA(50vmol／L)组；(5)高糖+Q．LA(100vmol／L)组；(6)高糖+仅．LA(200vmol／L)组；(7)高糖+0t．LA(300vmol／L)组。各组细胞在不同条件培养液中培养48h，取处于对数生长期细胞用于实验。观察HRPE细胞形态，用MTT法检测不同浓度仅．LA对细胞活力的影响，比色法检测丙二醛(malondialdehyde，MDA)、超氧化物歧化酶(superoxidedismutase，SOD)和谷胱甘肽(glutathione，GS均的变化，用双抗体夹心酶联免疫吸附(ELISA)法测定HRPE细胞

8、上清液中VEGF与PEDF的含量。结果：l高糖组的细胞活性明显低于正常对照组俨