资源描述：
《不同浓度胰岛素对高糖培养下视网膜色素上皮细胞增殖活力的影响》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。
1、不同浓度胰岛素对高糖培养下视网膜色素上皮细胞增殖活力的影响施光明1,3栾洁2(通讯作者)(1东南大学医学院江苏南京210009)(2东南大学附属屮大医院眼科210009)(3南通大学附属丹阳市人民医院眼科212300)【摘要】目的：研究不同浓度胰岛素对高糖培养K视网膜色素上皮细胞增殖活力的影响。方法：体外培养人RPE(ARPE-19},在高撒30mmol/L}浓度卞给予OU/L,100U/L,101U/L,102U/L,103U/L,104U/L胰岛素作用12h、24h、48h后用MTT法检测各组视网膜色素上皮细胞的增生活力。结果：各浓度胰岛素组在不同观察时间(12小时、24
2、小时、48小时)，其吸光度值(OD570)与空白对照组相比，差异无统计学意义(P>0.05),各组吸光度值(OD570)随作用时间的延长而有增加的趋势，差异具有统计学意义(P<0.05)o结论：胰岛素对高糖培养丁视网膜色素上皮细胞增殖活力无明显影响。【关键词】胰岛素细胞活力视网膜色素上皮细胞【中图分类号】R458+.5【文献标识码】A【文章编号】2095-1752(2013)34-0076-03【Abstract】Objective:Toinvestigatetheeffectofdifferentconcentrationsofinsulinontheproli
3、ferationofhighglucoseculturedhumanretinalpigmentepithelialcells-19invitro.Methods:Humanretinalpigmentepithelialcells(ARPE-19)wereculturedinvitro,exposedtohighglucosegroup,treatedwithdifferentconcentrationsofinsulin(OU/L、100U/L、101U/L、102U/L>103U/L、104U/L)respectively.Cellproliferationwasdet
4、ectedbyMTTassayafter12,24and48hours.Results:Therewasnostatisticalsignificantdifferenceamongdifferentconcentrationsofinsulininterventionconditionsingroupsofhighglucosecomparedtocontrols(P>0.05).Therewasastatisticallysignificantdifferencewiththeextensionoftime(P<0.05).Conclusion:Insulin
5、hadnoeffectontheproliferationofARPE-19cellsinthehighglucosecondition.引言糖尿病(diabeticmellitus，DM)是严重影响人们生命健康的常见病，其致残率、致死率仅次于心脑血管病以及癌症，糖尿病患者因糖代谢障碍导致全身各组织器官的微血管发生病变满中糖尿病视网膜病变(diabeticretinopathy,DR)是其最严重的微血管并发症之一，是成年人致盲的重要原因之一［1】。胰岛素注射治疗糖尿病被认为是控制血糖并减少糖尿病并发症的较好的手段，给糖尿病患者带来福音，但是随着研究的不断深入，对于胰岛素在DR
6、治疗上的争议越来越多。视网膜细胞的增殖与视网膜病变密切相关。我们通过研究不冋浓度胰岛素对高糖培养下视网膜色素上皮细胞增殖活力的影响，现将结果报告如下：1.材料和方法1.1材料人视网膜色素上皮细胞(culturedhumanretinalpigmentepithelialcells-19,ARPE-19)购自ATCC公司，DMEM/F12培养液(Gibco公司)，胰岛素(江苏万邦生化医药股份有限公司)，胎牛血清(FCS,杭州四季青)，0.05%Trypsin-EDTA(Gibco公司)，二甲基亚砜(DMSO,Sigma公司)，四甲基偶氮唑(MTT，Sigma公司)，酶标仪(mi
7、croplatereader)model860BIO-RAD。1.2方法ARPE-19悬液置于含奋10%FCS的DMEM/F12培养液的培养瓶内，于37°C,5%CO2培养箱中培养，隔天换液，待细胞长至融合后，用0.05%Trypsin-EDTA消化，离心，制成单细胞悬液，按1:4〜1:6传代。将长至融合状态的细胞以0.05%Trypsin-EDTA消化，离心，制成单细胞悬液。细胞增殖活性的测定取生长状态良好的ARPE-19细胞，采用上述传代方法消化,制成细胞悬液，计数，接种于96孔板,每组设6个平行复
