afp-l3和gp73联合检测在原发性肝癌诊断及疗效评估中的应用

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2、致谢等内容外，文中不包含其他人已经发表或撰写的研究成果，指导教师对此进行了审定。本论文由本人独立撰写，文责自负。研究生签名：程玩导师签章：美率．刎；年／月弘曰目录中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯00Q⋯⋯⋯⋯1英文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯4研究论文AFP．L3和GP73联合检测在原发性肝癌诊断及疗效评估中的应用⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯8前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯“⋯·⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一·8日IJ舌⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯“⋯”一⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一’b材料与方

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4、究概况⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯29致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯000⋯⋯000⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯37个人简历⋯000⋯⋯⋯⋯⋯⋯O0O0O00⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯38中文摘要AFP．L3和GP73联合检测在原发性肝癌诊断及疗效评估中的应用摘要目的：肝细胞癌(hepatocellularcarcinoma，HCC)是一种恶性程度高、进展快、预后差的恶性肿瘤。临床上肝癌确诊时已多属中、晚期，又缺乏有效治疗，术后易复发及远处转移，预后较差，因此早诊断、早治疗显得尤为重要。甲胎蛋白(AFP)是目前诊断原发性肝癌最重要的肿瘤标记物

5、，已被广泛用于肝癌的普查、诊断、判断治疗效果和预测复发，但AFP的敏感性和特异性较差。不同病变组织产生的甲胎蛋白含有的糖基不同，因此与植物外源性凝集素的亲和性也不同，借此可对AFP的来源作出判断，共分为AFP．L1、AFP．L2、AFP．L3，其中甲胎蛋白异质体3(AFP．L3)为凝集素结合型，是原发性肝癌细胞所特有。临床研究发现，AFP—L3对肝癌的诊断具有很高的准确率，比单纯应用总AFP能显著提高准确率。高尔基体蛋白73(GP73)是存在于高尔基体的一种跨膜蛋白，在正常人体肝组织中，GP73主要由胆管上皮细胞表达，而肝

6、细胞很少甚至不表达。乙肝病毒携带者的GP73水平虽高于健康者和非肝病患者，但远低于肝癌患者。GP73在肝癌诊断中的敏感性和特异性显著高于AFP。本研究采用AFP．L3、GP73联合检测，以期提高肝癌诊断的敏感度和阳性检出率，对肝癌作出早期诊断，并将AFP．L3、GP73在肝癌治疗前后的变化作为评价疗效的指标，指导临床。方法：选择我院2010年6月至2011年6月门诊就诊，健康体检及住院患者共110例，将研究对象分为3组：(1)原发性肝癌组：34例，(男25例，女9例)，入院前未接受过治疗，年龄(34--一69)岁，平均(5

7、0．2±8．2)岁，均经临床、B超、病理检查确诊；(2)肝炎、肝硬化组：46例，(男31例，女15例)，年龄(28-～65)岁，平均(46．64-8．8)岁，根据临床、B超、CT等综合检查诊断，并排除有肝占位；(3)健康对照组30例(男18，女12)，随机选择来我院体检人群，年龄(30--．55)岁，平均(45．24-9．2)岁。清晨空腹抽取静脉血3ml，分离血清，．20。C保存备用。AFP．L3％测定：AFP．L3的分离采用微量离心纯化柱，柱内装有耦联了小扁豆凝集素(LCA)的琼脂糖，可以特异结中文摘要合AFP．L3，经

8、过离心清洗洗去不结合的AFP，然后加入洗脱液，离心后收集的洗脱液中含有AFP．L3，然后应用化学发光法检测总AFP和AFP．L3的含量，再计算AFP—L3占AFP总量的百分比(AFP．L3)，以美国FDA批准AFP．L3≥10％作为阳性判断标准。血清GP73测定：采用酶联免疫定量方法检测，阳性结果为≥1