住院非腹泻儿童携带艰难梭菌的流行病学特征

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1、河北医科大学学位论文使用授权及知识产权归属承诺本学位论文在导师(或指导小组)的指导下，由本人独立完成。本学位论文研究所获得的研究成果，其知识产权归河北医科大学所有。河北医科大学有权对本学位论文进行交流、公开和使用。凡发表与学位论文主要内容相关的论文，第一署名为单位河北医科大学，试验材料、原始数据、申报的专利等知识产权均归河北医科大学所有。否则研究生躲幽锋师签二级学院领河北医科大学研究生学位论文独创性声明本论文是在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果，除了文中特别加以标注和致谢等内容外，文中不包含其他人已经发表或撰写的研究目录中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

2、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯1英文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯3研究论文住院非腹泻儿童携带艰难梭菌的流行病学特征引言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯5第一部分艰难梭菌快速培养方法的建立前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯7日lJ舌⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯7材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯7结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯1U“多日7K⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯l附图⋯⋯⋯⋯

3、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯11附表⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．⋯⋯⋯．．13讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯14小结⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯15参考文献⋯⋯⋯⋯．⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．15第二部分住院非腹泻儿童艰难梭菌的携带率及核糖体分型前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯。18月lI舌⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯芍材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯18结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

4、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯22附图⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯24附表⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯27讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．．29小结⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯3l参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯31结论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯35综述艰难梭菌在儿童中的定植与感染⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯36致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯47个人简历⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

5、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯48中文摘要住院非腹泻儿童携带艰难梭菌的流行病学特征摘要目的：艰难梭菌属严格厌氧菌，是医院获得性腹泻的常见病原菌，其形成的特征性芽孢对外界环境的抵抗力强，在疾病的传播中发挥着重要作用。进入机体后可不引起临床症状呈定植状态，在儿童体内有很高的定植率，国外对住院儿童艰难梭菌的携带情况已有相关研究，但国内尚缺乏相关数据。且由于其培养条件苛刻，国内只有少数实验室能够对其进行培养，快速培养艰难梭菌的方法对于临床实验室明确诊断艰难梭菌感染(ClostridiumdifficileinfectionCDI)至关重要。由于无症状儿童在

6、艰难梭菌的传播中发挥着重要作用，因此了解本地区儿童携带菌株的相关特征，对于CDI的预防有重要意义。本研究拟建立一种适合临床实验室使用的快速培养方法，并对石家庄地区住院非腹泻儿童携带的艰难梭菌进行分离培养，了解艰难梭菌在儿童体内的定植情况，同时与成人菌株进行同源性分析，了解同型菌株在儿童与成人间的传播情况。方法：对196份粪便标本进行改良快速肉汤孵育法(本实验室建立)、传统富集芽孢培养法、乙醇直接处理法、乙醇加牛磺胆酸钠法的比较，通过阳性率的比较找出最佳培养方法。并对2011年lO月．2012年6月石家庄地区三所医院中O．18岁住院非腹泻儿童的601份

7、便标本进行菌株筛选；用PCR的方法检测其毒素基因及核糖体分型，分型结果用NtsysPC2．0软件进行分析；将儿童分离到的菌株与同地区成人CDI患者的菌株进行比对，对同源性进行分析。结果：通过比较发现我实验室建立的改良快速肉汤孵育法与其他3种培养方法的阳性率无明显差别(38．3％，37．1％，35．2％，36．1％，P>O．05)。用快速肉汤孵育法在601份儿童粪便标本中共分离培养出艰难梭菌152株，总携带率为25．3％(152／601)，产毒株携带率为18．3％(110／601)；2岁以下婴儿与2．18岁儿童携带率分别为20．6％(81／394)、3

8、4．3％(7l／207)，2岁以下婴儿对产毒株的携带率较2-18岁儿童tL毛(14．7％VS．25．1％，P