mir-130a靶向调节pten基因影响人乳腺癌细胞对阿霉素的敏感性

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1、研究生个人简介陈志远，男，27岁，江苏徐州人，2010年毕业于徐州医学院，同年考取徐州医学院普外专业硕士研究生。研究生期间，专业理论知识扎实，具有较强的临床实践能力和较强的团队合作精神。顺利通过国家英语六级考试和国家执业医师资格考试。除此之外，该同学较好的掌握了一定的科研方法和思路，具备较强的创新能力。研究生期间参与国家自然科学基金支持项目，撰写学术论文5篇，获得国家实用新型专利2项。获得“挑战杯”大学生课外学术科技作品竞赛C类二等奖。该同学已经顺利修满学分，论文评审专家认为该论文已经达到硕士研究生毕业学位论文要求。一致同意该同学参加硕士论文答辩。目录缩略词表⋯⋯⋯⋯

2、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·1中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·2Abstract⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·4材料和方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一81材料⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一82方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯11结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯23讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯28结论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

3、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯30参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一31综述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯34攻读硕士学位期间发表学术论文⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯45临床培训小结⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯46致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯48论文独创性声明⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯49论文使用授权声明⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯49论文审阅认定书⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

4、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯50徐州医学院硕士学位论文缩略词AdrCDNADocDEPCDMSOEPIC50miRNAPBSPMSFPAGE印mR-T-qPCRAdriamycin缩略词表Abbreviation英文全称阿霉素中文全称Complementarydeoxyribonucleicacid脱氧核糖核酸DocetaxelDiethypyrocarbonateDimethylsulfoxideEppendorf50％inhibitingconcentrationmicroRNA多西紫杉醇焦碳酸二乙酯二甲基亚砜离心管半数抑制浓度微小RNAPhosphatebuf

5、fersaline磷酸盐缓冲液Phenylmethanesulfonylfluoride苯甲基磺酰氟Polyacrylamidegelelectrophoresis聚丙烯酰胺凝胶电泳法Revolutionperminute每分钟转速Real-timequantitativePCR实时荧光定量PCR徐州医学院硕士学位论文miR．130a靶向调节PTEN基因影响人乳腺癌细胞对阿霉素的敏感性中文摘要目的探讨miR-130a对PTEN基因表达的调控，以及它们与乳腺癌MCF一7细胞株阿霉素耐药的关系。方法利用miRNA芯片结合RT-qPCR的方法检测并验证miR-130a在人乳

6、腺癌亲代敏感细胞(MCF．7／S)、同系阿霉素耐药细胞(MCF．7／Adr)和多西紫杉醇耐药细胞(MCF．7／Doc)中的表达差异：通过靶基因预测软件预测PTEN可能为miR-130a的特异性靶基因：通过miR-130a模拟物(mimics)和抑制物(inhibitors)转染实验结合MTT法、RT-qPCR和免疫印迹法，观察miR-130a的表达变化对乳腺癌细胞阿霉素耐药性的影响及其与PTEN基因表达间的关系。结果与MCF．7／S相比，miR-130a在MCF．7／Adr中的表达水平明显增高(116834．70±4728．32倍；t=19．035，P=0．000)，

7、但在多西紫杉醇耐药株MCF．7／Doc中的表达无统计学差异(f=0．703，P--0．521)。MCF．7／S细胞转染miR-130amimics后，与阴性对照组相比，其miR．130a表达水平明显增高(17．686±1．057倍；t=8．360，P=0．001)，对Adr的耐药性增强[IC50：(0．606士0．164)mg／L坩(0．181i-0．060)mg／L：t=-5．200，P=-0．007]，同时PTENmRNA和蛋白表达水平明显下调，分别为阴性对照组的0．362±0．076倍(t=-2．927，P=-0．043)和0．386___0．