基于基因组改组技术选育多重抗性乙醇酵母

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1、现代食品科技ModernFoodScienceandTechnology2009,Vol.25,No.10基于基因组改组技术选育多重抗性乙醇酵母1,222221梁磊,张远平,黄向阳,徐日益,尚红岩,梁世中(1.华南理工大学生物科学与工程学院,广州510000)(2.广州甘蔗糖业研究所,广州510316)摘要:本文通过基因组改组(Genomeshuffling)技术将酵母菌株的多重耐受性能集中于同一菌株,从而选育出多重抗性的乙醇酵母。以分别经过热灭活和紫外灭活的酵母GZ-0533、GZ-241、GZ-582为亲本菌株,经过3轮基因改组后

2、,筛选得到的28株酵母菌。第二次改组得到的MSR14和第三次改组得到的MSR23对多重胁迫条件的耐受性提高最多,乙醇产量分别达到8.58%和8.86%,较多重抗性最好的出发菌GZ-05相对提高了7%和10.5%。26SrDNA序列分析表明,MSR14和MSR23的26SrDNA序列与酿酒酵母(Saccharomycescerevisiae)的同源性为100%,均认定为酿酒酵母。关键词:基因组改组技术;多重抗性乙醇酵母中图分类号:Q939.97;文献标识码:A;文章篇号:1673-9078(2009)10-1107-08Screenin

3、gofMultiple-stressResistantSaccharomycesCerevisaebyGenomeShufflingMethology1,2221LIANGLei,ZHANGYuan-ping,HUANGXiang-yang,LIANGShi-zhong(1.SchoolofBioscienceandBioengineering,SouthChinaUniversityofTechnology,Guangzhou510006,China)(2.GuangzhouSugarcaneIndustryResearchInst

4、itute,Guangzhou510316,China)Abstract:Usinggenomeshufflingtechnology,themultiplestressresistantyeastwasscreenedinthispaper.28mutantswereobtainedbyrestructuringthegenomesofthreeparentstrains.ItwasfoundthatMSR14obtainedfromthesecondshufflingandMSR23obtainedfromthethirdshuf

5、flinghadtheabilityofmultiplestresstolerance.Withthetwostrains,theethanolproductionreached8.58%(v/v)and8.86%(v/v)respectivelyundermultiplestress,,whichwerehigherby7%and10.5%respectivethanthoseofthebestparentstrainGZ-05.Accordingtothe26SrDNAsequenceanalysis,bothMSR14andMS

6、R23wereidentifiedasSaccharomycescerevisiae.Keywords:genomeshuffling;multiplestressresistantyeast作为燃料乙醇或酿酒的生产菌株,在发酵过程提高燃料乙醇产业的经济效益。在发酵过程中,减少中,酵母细胞会遭遇到多种不利于生长和发酵的环境后期乙醇分离提纯过程的成本,要提高发酵液中乙醇压力。尤其在华南甘蔗产区,年平均气温为29℃,的含量,就必然要求利用高浓度的糖作为发酵原料,夏季高达35~37℃,加上发酵过程放出的热量,发酵发酵前期高浓度的糖和发酵后期

7、高浓度的乙醇均会影温度往往可达到38℃以上。为了尽可能降低发酵温响酵母的生长和发酵性能,且这种副作用随着温度的[3]度,乙醇生产工厂通常采用盘管水冷却系统和喷淋冷增加而增强。耐受低pH值的酵母可以在低酸性条件水冷却系统来降温,由于冷却用地表水温度亦高,发下正常发酵,减少染菌机会。选育多重抗性乙醇酵母,酵温度仍难以控制,无法使发酵温度降到适宜发酵温提高酵母菌种对发酵温度、低pH、乙醇、渗透压等的度之内,造成酵母发酵力下降、衰老加快、容易感染多重耐受性的优良菌株,以提高乙醇发酵率,缩短发[4]杂菌,最终导致发酵率下降,生产成本增加,使工厂

8、酵周期,节约加工成本,提高乙醇产业的经济效益。[1,2]难以维持正常的生产。因此,选育耐高温乙醇酵母最近的研究表明,酵母菌对外界不利的环境条件菌株用于甘蔗燃料乙醇生产,有助于降低高温带来的的耐受性的生化机理十分复杂,其多

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