七氟烷和异氟烷对神经干细胞增殖和迁移的影响

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1、万方数据论文题目：七氟烷和异氟烷对神经干细胞增殖和迁移的影响答辩委员会主席：闻大翔教授万方数据温州医科大学硕士学位论文目录【IIiqlllll11111111111IIIIiqllllllIlUllJUIY2692145缩词简表⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯1中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯2英文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯3论文正文前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯4材料和方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯6结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯17分析与讨

2、论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯26结予台⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯29参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯29附录⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯32致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯34综述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯···35正文⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯35参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯41独创性声明⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯43万方数据温州医科大学硕士学位论文缩略词表(按字母顺序)缩写词

3、英文全称中文全称1万方数据温州医科大学硕士学位论文七氟烷和异氟烷对神经千细胞增殖和迁移的影响中文摘要目的：观察两种吸入麻醉药七氟烷和异氟烷暴露于胎鼠神经干细胞后，是否对神经干细胞的增殖和迁移产生影响。同时，观察这两种药物对神经干细胞发育调控基因(stat3，sox2，notchl和p21)和蛋白表达的影响。方法：神经干细胞的原代培养：取孕15天(E15)的SD大鼠，将其麻醉后，剥离出胎鼠的大脑皮层，取皮质中的神经干细胞，然后接种到DMEM／F12的完全培养基中培养，细胞接种的密度为(1-2)水106／ml，定时换液或传代，待生长稳定后传代至第三代(P3)随后把P3接种到六孔板中，

4、于4．9％七氟烷和2．8％异氟烷暴露处理6小时。待暴露处理完后，收集细胞继续培养2小时，然后从细胞中提取核酸和蛋白，标本冻存待用。实验被随机分为三组：C组(对照组)(n=6)，S组(七氟烷组)(n=6)，I组(异氟烷组)(n=6)。采用免疫荧光试剂盒EDU，在药物暴露前加入EDU，待暴露处理6h后，使用试剂盒染色，随后置于荧光倒置显微镜下荧光计数，统计出EDU阳性细胞数；药物暴露处理6小时后加入CellCountingKit．8(CCK．8)孵育2小时，随后检测细胞所在培养基的OD值；采用实时荧光定量PCR(Real．TimePCR)方法，检测待用的冻存标本中各组调节基因(sta

5、t3，sox2，notchl和p21)的表达量；采用蛋白免疫印迹技术Western．blot方法检测待用的冻存标本中各组P．stat3，stat3和sox2的蛋白表达。此外，七氟烷和异氟烷暴露后的细胞接种到transwell板中作用24小时，检测各组穿过transwell膜的细胞数量。结果：EDU结果显示，神经干细胞在异氟烷和七氟烷急性暴露处理后，与正常对照组(C组)相比，异氟烷组(I组)和七氟烷组(S组)细胞增殖数量减少(P<0．05)，通过PCR检测四种神经干细胞发育调控相关基因，发现与正常对照组(C组)相比，异氟烷组(I组)和七氟烷组(S组)的sox2，notchl，p21

6、的mRNA的表达量无差异(尸>0．05)。然而异氟烷组的stat3基因mRNA的表达量降低(尸<0．05)。Western．blot检测显示，与正常对照组(C组)相比，异氟烷组和七氟烷组p-stat3蛋白表达降低(尸<0．05)，而stat3蛋白没有明显改变(胗0．05)。迁移结果显示，与与正常对照组(C组)相比，transwell膜中异氟烷组和七氟2万方数据温州医科大学硕士学位论文烷组的细胞数量增加(P

7、t3蛋白磷酸化，而且抑制了stat3基因的转录。进而通过下游效应蛋白影响增殖和迁移。关键词：七氟烷，异氟烷，神经干细胞，增殖，迁移，调控TheeffectofsevofluraneandisofluraneontheproliferationandmigrationofneuralstemcellsUralstemcellsAbstractobjective：Thepresentstudywastoobserveiftreatingwithsevofluraneandisoflu