四倍体连翘组培快繁技术研究

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1、万方数据分类号：S鱼墨5：2垒密级：公珏单位代码：!QQ墨§学号：—2011—453四倍体连翘组培快繁技术研究R：pidpropagationtechniq。。tetraploidforsythiaRapidtechnique[ortetraploidtOrsythia1b‘ytissueculture学位申请人：袁小亚指导教师：任士福正高工学科专业：森林培育学位类别：农学硕士授予单位：河北农业大学答辩日期：二。一四年五月十九日万方数据独创性声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研

2、究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得塑兰垦壅些苤鲎．或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名：翻、啦签字日期：≯I妒年厂月弓日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解．亟韭盔些盘堂有关保留、使用学位论文的规定，有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅。本人授权塑耋垦盔些盘堂可以将学位论文的全部或部分内容

3、编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。(保密的学位论文在解密后适用本授权书)学位论文作者签名：苏心、丝p’签字昌期：≯Ⅳ年易月≥日学位论文作者毕业后去向：工作单位：通讯地址：一名：秒漪‘签字日期：砂lV年6月≥日电话：邮编：万方数据摘要本试验以四倍体连翘(tetraploidForsythia)当年生幼嫩枝条、叶片为试验材料，建立了四倍体连翘的组织培养体系。分别对外植体的消毒处理、初代培养、继代培养、生根培养和驯化移栽几方面进行试验，对影响四倍体连翘组织培养的因素进行了比

4、较系统地研究，从有利于工厂化育苗的目的出发，试图为四倍体连翘生物技术育种提供技术和方法，同时为其进一步遗传操作研究和扩大药材资源奠定基础。主要研究内容及结果如下：(1)外植体消毒以四倍体连翘茎尖、茎段和幼嫩叶片为外植体，进行消毒处理试验。选择75％酒精以及2％次氯酸钠配合使用进行灭菌处理。试验结果表明：2％次氯酸钠的处理时间长短对四倍体连翘外植体的消毒效果起到关键作用，需要严格控制。四倍体连翘茎尖、茎段外植体的最佳处理方式是75％酒精处理30S，2％次氯酸钠处理7min。四倍体连翘叶片外植体的最佳处理方式是75

5、％酒精处理30S，2％次氯酸钠处理3min。(2)植物离体培养以四倍体连翘茎尖以及带腋芽的茎段为外植体，探讨不同植物激素6-BA、NAA的不同浓度配比对组培苗离体培养的影响。试验结果表明：四倍体连翘的组织培养宜选择茎段为外植体。适宜四倍体连翘腋芽诱导的培养基为MS+6-BA2．0megL+NAA0．2mg／Lo适宜四倍体连翘茎尖、茎段增殖培养的培养基为MS+6-BA9．0mg／L+NAA0．05mg／L。(3)愈伤组织培养以四倍体连翘幼嫩叶片为外植体，探讨不同植物激素6-BA、2,4．D、NAA的不同浓度配比对

6、叶片愈伤组织诱导以及增殖培养的影响。试验结果表明：有利于四倍体连翘叶片愈伤组织诱导的培养基为MS+6一BA1．0mg／L+2,4．D1．0mg／L。经观察发现，在添加各种不同激素及不同配比的培养基上，叶片愈伤组织生长缓慢，颜色为黄绿色或深绿色，均未产生类似不定芽的小突起，继续培养一段时间后愈伤组织基本褐化死亡。(4)组培苗生根培养以通过增殖培养诱导出的丛生芽单芽为培养材料，进行生根培养，探讨不同植物激素IBA、lAA的不同浓度配比对组培苗生根培养的影响。试验结果表明：在试验范围内，适宜诱导四倍体连翘生根的培养基

7、为I／2MS+IBA0．4mg／L+IAA0．4mg／L，此时组培苗生根状况较好。(5)组培苗的驯化移栽将已经生根的组培苗进行驯化移栽，研究不同炼苗时间以及不同基质对四倍体连翘组培苗移栽成活率的影响。试验结果表明：炼苗处理与不炼苗处理对组培苗的移栽成活率方面存在显著性差异，经过炼苗处理的组培苗的移栽成活率显著高于不经过炼苗处理的小苗。四倍体连翘组培组培苗最佳炼苗处理方式为半开封口膜自然光3d-I-开瓶口室内4d。四倍体连翘组培苗最佳移栽基质为营养土：蛭石=3：1，此时，小苗万方数据叶色浓绿，生长健壮。关键词：四

8、倍体连翘；快速繁殖；愈伤组织；生根培养；驯化移栽万方数据RapidpropagationtechniquefortetraploidforsythiabytissuecultureAuthor：Xiaoya-YuanMajor：SilvicultureTutor：Shifu—Ren(CollegeofForestry，AgriculturalUniversityofHebei，Baod