unc5基因在斑马鱼前脑的早期表达及作用

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时间:2019-03-02

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1、後旦大学万方数据硕士学位论文学校代码:10246学号:10210700035unc5基因在斑马鱼前脑的早期表达及作用院系:专业:姓名:指导小组成员:完成日期:生命科学学院神经生物学杨斌彭刚教授高景霞助理研究员2013年4月22日万方数据复旦大学硕士论文Unc5基因在斑马鱼前脑的早期表达及作用目录中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..2英文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..3前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯5材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯7实验结果⋯⋯⋯⋯⋯

2、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.18讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..36参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯38附录⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.41综述⋯⋯⋯⋯⋯⋯.⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.41发表论文及获奖情况⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯53致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯。541万方数据复旦大学硕士论文Onc5基因在斑马鱼

3、前脑的早期表达及作用摘要Unc5家族蛋白作为一个轴突导向跨膜受体,最初从线虫中发现。在脊柱动物中,Unc5受体包括四大类,Unc5a、Unc5b、Unc5c及Unc5d。Unc5受体的特异性配体为分泌性轴突导向分子Netrin,并且通过Netrin的调节介导神经元轴突生长锥排斥作用。多年研究发现,Unc5家族蛋白也在血管生成和致癌作用中起到作用。本文旨在探索在斑马鱼体内Unc5家族成员Unc5a,Unc5c,Unc5da和Unc5db的具体表达情况及在前脑特异性表达的Unc5家族成员对前脑发育的影响。本文对Unc5基因家族成员(Unc5a,Unc5c,Unc5da和Unc5db)进

4、行反转录PCR(RT-PCR)及原位杂交研究。反转录PCR结果显示所有转录本都在母源时期表达。Unc5c在整个事件轴中持续性表达,从shield时期直至48小时,而Unc5a,Unc5da和Unc5db在24小时及之后的时期具有明显表达。在原位杂交检验中,Une5a,Unc5da和Unc5db在24小时到48小时胚胎端脑区域明显表达,并在部分丘脑和后脑中也有表达。在Unc5a.Une5da和Unc5a.Une5db的荧光原位杂交结果中显示,端脑区域表达有明显重叠。Unc5c在顶板,后脑和嘴部区域具有表达。Anteriorcommissure(AC),即前连合,是一条跨越中线连接两侧

5、大脑半球的神经纤维,它位于斑马鱼脑前端,在端脑的视柄之前。在特异性敲减位于端脑区域表达的Unc5a基因时,AC发育及路径选择发生明显变化。一部分AC仍然沿正常走向形成神经纤维束,另一部分轴突则在接近前侧的位置与原轴突束发生分支,并选择更深层和更靠背侧的路径进行延伸。此时免疫组织化学的结果也显示轴突束发生分支的同时,其轴突束周围神经胶质细胞的分布同时发生改变,并围绕分支的轴突束也呈现分支情况。同时敲减Unc5a基因和Unc5da基因可以明显提高突变率,并出现神经元迁移异常并滞留中线位置的表型。此结果揭示Unc5基因家族在斑马鱼前脑发育和轴突生长及导向中具有重要作用。关键词:Unc5;

6、端脑;胚胎发育;斑马鱼;前连合万方数据复旦大学硕士论文UncS基因在斑马鱼前脑的早期表达及作用AbstractUNC5familyproteinsareaxonguidancetrans-membranereceptorswhichwerediscoveredinC.elegans.TherehavebeencharacterizedfourorthologousofC.elegansUNC一5,includingUNC5A,Unc5b,Unc5candUnc5Dinvertebrates.Asonekindofimportantreceptors,Une5familyprotei

7、nsmediatelong-distanceandshort-distancerepulsionsignalsfortheaxonalgrowthconesresponsetotheirligand,Netrin.TheUNC5familyproteinsmayalsoplaycriticalrolesinangiogenesisandcarcinogenesis.HereweshowedtheexpressionpatternofzebrafishspecificU

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