金黄色葡萄球菌肠毒素a(sea)适配子的筛选及应用

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1、+分类号：R376.991学校代码：10392学科专业代码：100208学号：200901365福建医科大学硕士研究生毕业论文金黄色葡萄球菌肠毒素A（SEA）适配子的筛选及应用InvitroselectionofaptamerstoStaphylococcusenterotoxinA(SEA)andtheirapplication学位类型：医学硕士所在学院：福总临床医学院研究生：张鲜惠学科、专业：临床检验诊断学导师：兰小鹏教授研究起止日期：2011年5月至2012年5月答辩日期：2012年5月30日二O一二年五月万方数据福建医科大学硕士学位

2、论文1万方数据福建医科大学硕士学位论文目录英文缩略词表………………………………………………………………………3中文摘要……………………………………………………………………………4英文摘要……………………………………………………………………………6正文…………………………………………………………………………………9前言……………………………………………………………………………9一、材料和方法…………………………………………………………12二、结果…………………………………………………………………25三、讨论………………………………………………

3、…………………33四、结论…………………………………………………………………39参考文献……………………………………………………………………………40综述…………………………………………………………………………………45致谢…………………………………………………………………………………562万方数据福建医科大学硕士学位论文英文缩略词表ABRIVIATIONS缩写英文全称中文全称Ampampicillin氨苄青霉素Apalkalinephosphatase碱性磷酸酶BSAbovineserumalbumin牛血清白蛋白DHAdothybrid

4、izationassay斑点杂交法DM－SdynabeadsM-280streptavidin链酶亲和素标记磁珠DMSOdimethylsulfoxide二甲基亚砜dNTPdeoxyribonucleosidetriphosphate脱氧核苷三磷酸dsDNAdoublestrandedDNA双链DNAEBethidiumbromide溴化乙锭EDACethyldimethycarbodiimide乙基碳二亚胺盐酸盐EDTAethylenediaminotetraceticacid乙二胺四乙酸ELADAenzyme-linkedaptamer

5、directassay酶联适配子直接检测法ELISAenzyme-linkedimmunosorbentassay酶联免疫吸附法IPTGisopropylthio-β-galactoside异丙基硫代-β-D-半乳糖苷Kdthedissociationconstant解离常数LBlurib-BertanimediumLB培养基MTT3-(4,5-Dimethylthiazol-2-yl)-2,3-(4，5-二甲基噻唑-2)-2，5-二苯5-diphenyltetrazoliumbromide基四氮唑溴盐ODopticaldensity光密度

6、PBSphosphatebufferedsolution磷酸盐缓冲液PBMCperipheralbloodmononuclearcell人外周血单核淋巴细胞PCRpolymerasechainreaction聚合酶链式反应SAstreptavidin链霉亲合素SEAStaphylococcusaureusenterotoxinA金黄色葡萄球菌肠毒素ASELEXsystematicevolutionofligandsbyexponential指数富集配基的系统进化enrichmentssDNAsingle-strandedDNA单链DNATr

7、istris（hydroxymethyl）aminomethane三羟甲基氨基甲烷X-gal5-Bromo-4-chloro-3-indolyl-D-galactoside5-溴-4-氯-3-吲哚-1-β-D-半乳糖3万方数据福建医科大学硕士学位论文金黄色葡萄球菌肠毒素A（SEA）适配子的筛选及应用中文摘要【目的】利用指数富集配基的系统进化(SystematicEvolutionofLigandsbyExponentialenrichment,SELEX)技术获得能高亲和力高特异性结合金黄色葡萄球菌肠毒素（SEA）的功能性适配子，为建立适配

8、子快速检测SEA的方法奠定基础，并为治疗金黄色葡萄球菌的感染提供新的思路。【方法】1.体外合成中间为40nt的随机序列，两端为固定序列，全长共76nt的ssDNA寡核苷酸文库。利