钾离子通道在b-16黑素肿瘤细胞和大鼠小脑颗粒细胞迁移中的作用研究

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1、复旦大学博士学位论文钾离子通道在B-16黑素肿瘤细胞和大鼠小脑颗粒细胞迁移中的作用研究姓名：刘琳云申请学位级别：博士专业：神经生物学指导教师：梅岩艾20070401缩写uluM年》盘ACBAmBrdUBSAcAMPCNScTxD1VDMEMDMSOECsoEDlAEGlAEGLFr-1FcsFn℃GClGLGB～PGOHEPES缩略语及符号英文名称MicroliterI_tmol／L4-aminopyridineadenylylcyclasebis-(o-aminopbenoxy)一N，N,N9，N9-tetraaceticacid5一bmmo-2

2、’-deoxyuridinebovineserumalbumincyclicadenosinemonophosphatecentmlnervoussystemCholemtoxinday(s)invitroDulbecco’SModefiedEagle'smediumdimethylsulfoxideconcentrationofhalf-maximalresponseethylenediaminetetraaceticacidEthyleneglycol-bis(h—aminoethylether)-N，N,NV,NV-tetraaceticac

3、idexternalgranulecelllayerEndothelin．1fetalcalf辩mmfluoresceinisothiocyanategranulecellInnergranulecelllayerglialfibrillaryacidicproteinGigaohmN一【2一hydroxyethyl]piperazine-N'-[2-ethanesulfonicacid】中文名称微升微摩尔每升4一氨基吡啶环腺哲酸酶5．溴．2’．脱氧尿茁牛血清蛋白3：5’．环腺苷酸中枢神经系统霍乱毒素体外培养天数培养基二甲基讵砜半反应浓度乙二胺四乙

4、酸外颗粒细胞层内皮素一1胎牛血清异硫荧光素颗粒细胞内颗粒细胞层胶质纤维酸性蛋白千兆欧姆3“，KKvMLMOMTM1RP7791PBSPCLP11APKAPKC4．P．PDOTm(S．D．S．E．M．SSCTEATTXtA-typetransientoutwardK+currentdelayedrectifieroutwardK+currentvoltage-gatedpotassiummolecularlayermegaohmMelatoninmelatoninreceptorHilltoefficientnumbetofcellsprazosin

5、phosphate-bufferedsalinePurkinjecelllayerparaformaldehydeproteinkinaseAproteinkinaseC垂phenyl一2一propionamidotetralinPertussistoxinstandarddeviationStandardeiTorsalinesodiumcitrateTetraethylammoniumchloridetetrodotoxintimeconstantA犁瞬时外向钾电流j正迟整流钾电流电压门控通道分子层兆欧姆褪黑素褪黑素受体Hill系数细胞粒数磷酸

6、缓冲盐溶液蒲式细胞层多聚甲醛蛋白激酶A蛋白激酶C百日咳毒素标准差标准误柠檬酸钠盐溶液四乙铵河豚毒素时间常数4论文独创性声明本论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。论文中除了特别加以标注和致谢的地方外，不包含其他人或其它机构已经发表或撰写过的研究成果。其他同志对本研究的启发和所做的贡献均已在论文中作了明确的声明并表示了谢意。作者签名论文使用授权声明日期：本人完全了解复旦大学有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权保留送交论文的复印件，允许论文被查阅和借阅；学校可以公布论文的全部或部分内容，可以采用影印、缩印或其它复制手段保存论文。

7、保密的论文在解密后遵守此规定。作者签名：导师签名：——日期：中文摘要细胞迁移在许多生理和病理过程中都发挥着关键作用，如胚胎发育、神经系统发育、免疫防御、伤口愈合或是肿瘤转移。目前，已有研究表明，迁移的胞内机制可以被转运体和离子通道调节，这之中大量的钾通道、钙通道、氯通道和NMDA受体门控离子通道都参与其中。例如：电压依赖型钾通道与淋巴细胞以及胚胎神经细胞的迁移有关联；小脑颗粒细胞的迁移需要N型钙通道和NMDA受体的活性。虽然使用离子通道阻断剂可以研究离子通道和细胞迁移的关系，但还是很少有报道为离子通道和细胞迁移之间的联系提供直接证据。为进一步了解钾

8、离子通道在细胞迁移中的作用机制，我们选择两种不同的细胞模型，使用全细胞膜片钳记录、Transwell细胞迁移分析等实验方法