钾离子通道在不同胎龄大鼠动脉导管收缩的作用论文

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1、钾离子通道在不同胎龄大鼠动脉导管收缩的作用论文.freelchannelsinoxygen-inducedcontractionofductusarteriosusinfetalratofdifferentgestationage【Abstract】ObjectiveToinvestigatedtheroleofATPsensitivepotassiumchannelandvoltage-dependentpotassiumchannelinoxygen-inducedcontractionofductus

2、arteriosesofrat.MethodsIsometricforceofcontacttissueandpotassiumcurrentinsinglesmoothmusclecellsofductusarteriosuseasuredintature)and21st(mature)gestationagerespectively.Theeffectsofpinacidil(KATPactivater)，glybenclamide(KATPinhibitor)，and4-aminopyridine(K

3、Vinhibitor)idecontractedductusarteriesin21stgroupbutnotin19thgroup.Potassiumcurrentincreasedbyapplyingpinacidilintheperfusionsolutionanddecreasedbyglybenclamide.Thechangeofthecurrents，togetherembranepotentialinopyridineaybeoneoftheO2sensorsinductusarterios

4、es.Itaturefetus.andparticipateintheirpoorreactiontooxygenandhighincidenceofpatentductusarteriosus.【Keychannel；prematurefetus新生儿的动脉导管通常在生后数小时到数日关闭。出生后随着呼吸的开始，血氧分压升高是动脉导管收缩的重要原因。早产儿动脉导管对氧浓度变化的反应欠佳，与早产儿动脉导管对氧的敏感性尚未成熟有关。提高灌流液氧分压可引起离体动脉导管收缩。这种氧气引发的动脉导管收缩的机制尚不明确

5、。氧气诱导血管内皮释放内皮素是使动脉导管收缩的原因之一［1］。Roulet和Coburn［2］发现血氧分压升高可引起细胞膜去极化。研究发现ATP依赖的钾通道（ATP-dependentKchannel，KATP，）阻断剂格列本脲，可收缩动脉导管；而KATP开放剂克罗卡林，可以拮抗氧气引发的动脉导管收缩［3］。因此，笔者推测富氧可以关闭KATP，从而使平滑肌细胞膜去极化。但是Tristani-Firouzi等［4］发现在动脉导管也存在着电压依赖的钾通道（voltage-dependentKchannel，Kv

6、），并在富氧的条件下关闭，因此他们认为动脉导管上的氧感受器是Kv。KATP和Kv在动脉导管收缩中的作用仍然没有定论。在我们以前的实验中发现，氧气引发的动脉导管收缩现象只在胎龄21天的胎鼠动脉导管出现，而在19天的不能引出［5］。在动脉导管中作为氧感受器的通道，在早产儿应该尚未发育成熟。因此，本研究的目的是了解胎鼠动脉导管平滑肌中KATP和Kv发育情况及它们在动脉导管收缩中的作用，以探明动脉导管的收缩机制。1对象与方法1.1对象未生育过的)：NaCl，142；KCl，5；CaCl2，1.5；glucose，6

7、；MgCl2，1；HEPES，5；用NaOH滴定到pH7.4，再用100%氮气(N2)平衡。在解剖显微镜下从胸腔取出动脉导管，制备成0.4～0.6mm长的血管环段，然后放于37℃的浴槽。1.1.2电生理实验使用新鲜分离的单个平滑肌细胞所有用于制备和保存单个动脉导管平滑肌细胞的液体均以100%N2平衡。动脉导管和肺动脉从胸腔取出后放置于去钙的Hanks溶液。Hanks液成分(mM)：NaCl138.8，KCl5.4，NaH2PO41.2，MgCl20.5，HEPES10，EGTA0.1，用1MNaOH滴定到p

8、H7.4。然后把血管剪成小片、置于没有EGTA的Hanks’消化液，其中含有木瓜蛋白酶0.4mg/ml，二硫苏糖醇0.19mg/ml，以及牛血清白蛋白0.2mg/ml；在37℃水箱中消化5～8min，再置于没有EGTA、含有胶原酶0.25mg/ml的Hanks’液，37℃消化5～7min。再把胶冻样的组织用毛细吸管移至加有10mg/ml葡萄糖的普通Hanks’液并保存在冰中，实验开始前轻轻搅动即可获得单个细胞。1