苦参素对实验性变态反应性脑脊髓炎大鼠防治作用的研究

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1、目录1苦参素对实验性变态反应性脑脊髓炎大鼠防治作用的研究⋯11．1中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯11．2英文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯61．3前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯131．4材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯l61．5结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯231．6讨论⋯····⋯⋯········⋯⋯······⋯·······⋯······⋯¨．．一⋯⋯．．391．7结论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯521．8参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯531

2、．9附图⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯601．10英汉缩写对照表⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯632致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯653苦参素治疗免疫性疾病的研究进展(综述)⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯66苦参素对实验性变态反应性脑脊髓炎大鼠防治作用的研究摘要目的：观察苦参素(MAT)对实验性变态反应性脑脊髓炎(EAE)的防治作用，探讨MAT对EAE大鼠防治作用的机制，为其治疗多发性硬化(MS)寻找理论依据。方法：将6．7周龄、体重180-2209的雌-F生Wistar实验大鼠50只按每组10只的数量随机分成5组。以豚鼠脊髓匀浆(GPSCH)作为致敏抗

3、原，完全福氏佐剂(CFA)作为抗原佐剂，两者混合后制成致敏剂对随机选出的4组大鼠进行致敏后建立EAE模型，并设为EAE对照组，低、中、高剂量MAT组(MAT-L组、MAT-M组、MAT—H组)，剩余1组为正常对照组。自造模当日起，正常对照组和EAE对照组不做任何处理常规饲养，MAT—L组、MAT—M组、MAT—H组连续15日分别应用MAT胶囊50mg／kg·d、100mg／kg·d、200mg／kg·d剂量灌胃一次。造模后需每日定时观察各组Wistar实验大鼠的临床表现如精神饮食、体重变化、肢体活动等以确定发病潜伏期、进展期，并进行高峰期神经功能障碍评分。未发病的大鼠观察1月后处

4、死，发病的EAE大鼠以连续3天观察神经功能障碍评分未加重，或出现严重共济失调、肢体完全瘫痪、濒死的时间作为实验终止时间。同时在实验终止时留取大鼠外周静脉血、脑组织等保存待检测。通过病理检查、ELISA等检测方法，观察大鼠发病高峰期脑组织炎症病理改变及脑组织匀浆中Thl、Th2、Thl7代表性细胞因子浓度变化和静脉血髓鞘碱性蛋白(ⅧP)浓度、T淋巴细胞亚群(CD4+、CD8+)比例变化。根据EAE和MS的免疫机制选定Y一干扰素(IFN—Y)、白细胞介素-4(IL-4)、白细胞介素一17(IL一17)分别作为Thl、Th2、Thl7代表性细胞因子。通过SPSSl7．0软件对数据进行统

5、计学分析。结果：1．大鼠发病情况：(1)临床表现：正常对照组大鼠精神、饮食、睡眠及活动同平时，未见有发病表现。EAE大鼠造模后不同程度出现毛色暗淡、精神差、饮食睡眠下降、活动减少、尾巴无力、肢体瘫痪、大小便失禁，甚至抽搐死亡等现象。各MAT组大鼠的临床表现较EAE对照组轻，其中以MAT—H组最轻。(2)发病潜伏期：EAE大鼠发病潜伏期时间以EAE对照组最短，为9．30+0．94天；MAT—H组最长，为16．60+0．97天。与EAE对照组相比，各MAT组潜伏期时间延长显著(P<0．01)；MAT—L组、MAT-M组、MAT—H组大鼠潜伏期时间依次延长，各MAT组间比较具有统计学差

6、异(P<0．01)。(3)疾病进展期：各组EAE大鼠疾病进展期时间以EAE组最长，为7．20±1．14天；MAT—H组最短，为2．90±O．74天。与EAE对照组相比，各MAT组进展期时间显著变短(P<0．01)；MAT—L组、MAT—M组、MAT—H组大鼠进展期时间依次缩短，各MAT组间比较具有统计学差异(P<0．01)。(4)发病高峰期神经功能障碍评分：疾病高峰期各组EAE大鼠神经功能障碍评分以EAE对照组最高，为3．70±O．95分；MAT—H组最低，为2．00_+o．82分。与EAE对照组相比，各MAT组神经功能障碍评分显著下降(P<0．01、P<0．05)；MAT-L组

7、、MAT-M组、MAT—H组大鼠神经功能障碍评分依次降低，各MAT组间比较具有统计学差异(P<0．05)。(5)发病症状严重程度及死亡率：各组EAE大鼠发病症状及死亡率以EAE对照组最高，MAT-H组最低；与EAE对照组相比，各MAT组发病症状及死亡率降低(P<0．01、P<0．05)。MAT-L组、MAT—M组、MAT—H组大鼠发病症状及死亡率依次降低，各MAT组问比较具有统计学差异(P<0．05)。2．中枢神经系统(CNS)病理变化：(1)脑组织病理变化：各组EAE大鼠脑组织