调控sirt1arenrf2信号通路对pq中毒小鼠肺损伤的保护作用

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1、万方数据温州医科大学硕士学位论文论文题目：遢控曼亘基!呈螋丛墼2值曼道路盟里Q生耋型∑答辩委员会成员：王堂皇j匕立迹麴医陵复趁抖万方数据温州医科大学硕士学位论文目录舢舢Ⅷ删删㈣舢川删Y2691881一、英文缩略词表⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．1二、论文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．3中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．3英文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．6三、论文正文⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．9前言⋯

2、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．9第一部分NEF2与SIRTl的相互作用及过表达慢病毒载体的构建1引言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．112材料和方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯113结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．214讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．255参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯26第二部分过

3、表达慢病毒载体的验证⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．281材料和方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯282结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．293讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．314参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯3l第三部分调控NIU2／AI吲SII汀1信号通路对百草枯中毒小鼠肺损伤中氧化应激水平的影响⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．33万方数据温州医科大学硕士学位论文1引言⋯⋯⋯

4、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．332材料和方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯333结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．414讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．505参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯52四、全文小结⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯54五、已发表或待发表论文⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯55六、致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

5、⋯⋯⋯56七、综述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯57八、学位论文独创性声明⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯66万方数据中文缩略词中英文对照表万方数据2万方数据温州医科大学硕士学位论文调控SIRTl／ARE／NRF2信号通路对PQ中毒小鼠肺损伤的保护作用中文摘要目的：氧化应激在百草枯(paraquat,PQ)中毒发病机制中的作用己得到广泛认同，核因子E2相关因子2(nuclearfactorE2．relatedfactor．2，Nrf2)作为调节细胞内氧化．抗氧化平衡的关键转录因子参与PQ

6、肺损伤的病理生理过程。研究其调节方式及机制将有助于深化对PQ中毒发病机制的认识。积累的资料表明，沉默信息调节因子l(silentinformationregulator1,Sirtl)可通过多种途径调节抗氧化分子的表达，并且与Nrf2的稳定性和活性关系密切，有可能由此参与Nrf2介导的氧化应激的调节过程。本研究旨在通过体外实验，证明Nrt2与Sirtl蛋白间存在相互作用的前提下，运用基因转染技术调节二者的表达，探讨Sirtl／ARE／Nrf2信号通路对于PQ中毒小鼠肺损伤的保护作用，为PQ中毒肺的抗氧化损伤治

7、疗提供理论依据。方法：实验一：培养小鼠原代II型肺泡上皮细胞，用PQ暴露后，利用免疫共沉淀技术(co．immunoprecipitation，CO．IP)，分别以Nrf2和Sirtl作为一抗，正反验证在氧化应激条件下，N咆蛋白与Sirtl蛋白是否具有相互作用；构建携带Nrf2和Sirtl基因的过表达慢病毒载体。实验二：通过绿色荧光表达量验证慢病毒载体的转染效率，并以PCR和Western．blot技术分别从基因和蛋白水平检测Nrf2及Sial的表达情况，进一步验证过表达慢病毒载体构建。实验三：利用骨髓间充质干

8、细胞系(bonemarrowmesenchymalstemcells，BMSC)较强的迁移能力及向受损肺组织“归巢”的特性，建立携带Nrf2、Sirtl的BMSC系，再用其对PQ中毒小鼠进行干预。145只ICR小鼠分为以下8组：①空白对照组②NS组③PQ组④PQ+NS组(亘)PQ+LV-MSC．GFP组(查)PQ+LV-MSC．Nrf2组OPQ+LV-MSC-Sinl组⑧PQ+LV-MSC．Nrf2