适冷α-淀粉酶菌株培养基研究 毕业论文

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1、适冷淀粉酶发酵培养基研究大连大学DALIANUNIVERSITY2013届毕业论文（设计）题目名称：适冷α-淀粉酶菌株培养基研究所在学院：生命科学与技术学院专业（班级）：09级生物工程2班学生姓名：指导教师：评阅人：院长：适冷淀粉酶发酵培养基研究摘要适冷淀粉酶是一种重要的适冷酶类，主要来自于适冷微生物。本研究从大连大黑山筛选出1株适冷淀粉酶高产菌株，通过菌株的形态特征鉴定确定其为微小杆菌属，为革兰氏阳性菌。对淀粉具有专一分解能力，命名为菌株D2。对菌株D2的发酵产酶培养基进行单因素实验研究，在单因素试验的基础上，采用Plackett-Burman(P-B)设计和响

2、应面试验设计(RSM)对产酶进行优化。影响菌株D2产酶的主要因素是可溶性淀粉、牛肉膏和氯化钠的添加量，可溶性淀粉42.32g/L,牛肉膏15.35g/L，氯化钠15.66g/L时最利于适冷淀粉酶的产生，酶活能达到116.05U/mL，比优化之前提高了247.86％。关键词：适冷微生物；适冷淀粉酶；发酵培养基；发酵培养基优化III适冷淀粉酶发酵培养基研究AbstractCold-adaptedamylaseisanimportantcold-adaptedenzymes,mainlyfromthecold-adaptedmicroorganisms.Thisstud

3、yDalianMontenegroscreenedacold-adaptedamylaseproducingstrain,strainthroughmorphologicalcharacterizationidentifieditastinyspp,Gram-positivebacteria.AbilitytodecomposestarchwithspecificnamedstrainD2.AgainststrainsofD2Fermentationmediumforunivariateexperimentalstudy,basedonasinglefactore

4、xperiments,usingPlackett-Burman(PB)designandresponsesurfaceanalysis(RSM)onenzymeproductionoptimization.D2straineffectisamajorfactorenzymesolublestarch,beefextract,andtheaddedamountofsodiumchloride,solublestarch,42.32g/L,beefextract15.35g/L,NaCl15.66g/Lthemostfavorablecold-adaptedamyla

5、seproduction,enzymeactivitycanreach116.05U/mL,thanbeforeoptimizationincreased247.86%.Keywords:cold-adaptedmicroorganisms;cold-adaptedamylase;fermentationmedium;fermentationmediumoptimizationIII适冷淀粉酶发酵培养基研究目录绪论51.本文立题意义52.1极端微生物52.1.2适冷酶简介62实验仪器及试剂72.1实验仪器72.2实验试剂83菌株D2发酵培养基研究93.1材料93.

6、1.1菌株93.1.2培养基93.2方法93.2.1发酵方法93.2.2适冷淀粉酶粗酶液的制备方法93.2.3酶活测定方法103.2.4菌体最适培养温度确定103.2.5菌株生长曲线测定103.2.6时间-酶活曲线测定103.2.7发酵培养基优化103.3结果与分析123.3.1葡萄糖标准曲线绘制123.3.2最适培养温度确定133.3.3生长曲线163.3.4酶活曲线173.3.5发酵培养基优化194结论295参考文献306致谢31附录1外文译文32附录2外文原文34III适冷淀粉酶发酵培养基研究绪论1.本文立题意义淀粉是粮食作物中含量最高的营养成分，除了可直接

7、作为食物外，对淀粉进行深加工还可以生产很多食品与化工产品。因此对淀粉质原料进行深加工的同时尽量节约粮食与能源是十分必要的。随着能源危机的日益加剧以及人们环境保护意识的逐渐提高，节能减排在工农业生产中越来越受到重视。由于适冷酶类能在低温或者室温下充分发挥催化效力，省去了昂贵的加热供热设备，节省了能源，降低了成本，也起到了节能减排的作用，因此在工农业生产领域具有一定的应用优势。适冷淀粉酶主要由嗜冷菌和耐冷菌产生[1]，在这些低温菌体内，它们必须产生特殊的基因、蛋白质和酶类来适应生存环境，因此从中可以分离到我们所需的适冷淀粉酶。浩瀚的海洋是资源和能源的宝库，其环境温度相

8、对来说比较