实验-产淀粉酶菌株的筛选.ppt

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1、实验一产淀粉酶菌株的筛选一、实验目的从土壤中筛选一株能够合成分泌淀粉酶的微生物二、实验原理自然界中有些微生物能够以淀粉作为碳源进行生长繁殖。这是因为它们能够合成分泌淀粉酶。当能合成淀粉酶的微生物在固体培养基中生长时，会将淀粉酶分泌到菌体周围，使菌落周围的淀粉水解成为小分子量的糊精、聚糖和单糖。在用碘显色时，在菌体周围形成透明圈。三、实验材料及仪器实验材料：蛋白胨牛肉膏NaCl琼脂可溶性淀粉碘液实验仪器：牛皮纸培养皿试管涂布棒恒温培养箱玻璃珠四、实验步骤1.筛选培养基的配制可溶性淀粉2g，NaCl5g，牛肉膏5g，蛋白胨10g

2、，琼脂20g，水1000mL。2.碘液的配制称取KI2g，用50mL去离子水溶解，迅速称量I20.5g并加入KI溶液中，用纯水定容到100mL，搅拌溶解后保存在棕色瓶中，橡皮塞封口。3.土样的采集（1）每一小组不同环境取土样并记录当时取样环境情况。（2）以小组为单位进行稀释分离：取土样1g，加入9mL无菌水，逐步稀释至105、106、107，每个梯度涂2个平皿。（3）30℃恒温培养48h。四、实验步骤图示：梯度稀释法分离微生物（4）产淀粉酶菌株的鉴定。取其中一皿喷洒稀碘液记录有水解圈的单菌落，与此对应找出合成淀粉酶的菌株。比

3、透明圈＝透明圈直径（mm）/菌落直径（mm）（5）每小组挑取活性优良的菌株接入斜面试管保存。四、实验步骤1.取样环境情况地点一：地点二：地点三：2.绘制透明圈五、实验结果地点一地点二地点三产酶菌落数比透明圈六、结果分析从不同地点获得的结果为什么会出现差异？可以初步得出什么样的结论？七、思考题1.为什么要用淀粉作为碳源？2.为什么要及时观察实验结果，否则会有什么样的后果？3.为什么同一个土样要稀释不同梯度进行涂平板？