atoh1过表达调控哺乳动物耳蜗毛细胞再生的体外研究

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1、万方数据复旦大学硕士研究生论文Atohl过表达调控哺乳动物耳蜗毛细胞再生的体外研究Atohloverexpressionregulatecochlearhaircellregenerationinneonatalmammalsinvitro硕士类型：临床医学硕士专业：耳鼻咽喉科学研究方向：临床技能训练与研究姓名：罗文伟导师：迟放鲁教授导师组成员：袁雅生副主任医师杨娟梅博士王璩副主任医师韩朝副主任医师任冬冬副主任医师万方数据复旦大学硕士学位论文目录缩写词表⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯2中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

2、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯3Abstract⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯5前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯--7第—部分：抑制Notch信号通路促进ktohl诱导的耳蜗毛细胞再生的体外研究材料⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一·9实验方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯10附图与结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯13讨论．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．一．．-----------一一一一--------一20结论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯22第二部分：ktohl表达水

3、平及作用时间调控耳蜗异位毛细胞再生材料⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯23实验方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一24附图与结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯26讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯37结论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯39第三部分：ktohl诱导的异位再生毛细胞群体汇聚迁移现象及相关影响因素材料⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯40实验方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯-41附图与结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯42讨{念⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯48结{仑⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

4、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯51参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯-52全文小结⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯55综述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·-56承担科研项目⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一63发表文章⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯64致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．65万方数据复旦大学硕士学位论文中文名称人腺病毒血清型五型骨形成蛋白磷酸盐缓冲溶液达氏修正伊氏营养培养基胎牛血清Noah通路抑制剂二甲亚砜毛细胞出生后第1天耳蜗体外培养天数胚胎小上皮脊鼠Math

5、l的同源基因增强绿色荧光蛋白毛细胞样细胞异位毛细胞样细胞汇聚伸展缩略词表缩写Ad5B27PBSDMEM／F'12FBSDAPTDMSOHCsP1CODIVELERAtohl／MathlEGFPHCLsEHCLsCE2英文全名Humanadenovirusserotype5MorphogenesisproteinPhosphatebuffersolutionDulbecco’SModifiedEagleMedium：NutriemMixtureF．12FetalbovineserumT-SecretaseinhibitorIX

6、DimethylsulfoxideHaircellsPostnatalDay1CochlearDayinvitroEmb巧oLesserepitheliaridgeMouseAtonalHomologue1EnhancedgreenfluorescentproteinHaircell．1ikecellsEctopichaircell·likecellsConvergentextension万方数据复旦大学硕士学位论文Atom过表达调控哺乳动物耳蜗毛细胞再生的体外研究中文摘要目的：Atohl／Mathl基因诱导耳蜗原位及异位毛

7、细胞再生已经得到体内及体外实验证实，抑制Notch信号通路可以诱导新生鼠及胚胎额外毛细胞再生，但Notch信号通路与Atohl共同作用于新霉素处理后的感觉上皮诱导毛细胞再生的效果尚无研究。Atohl表达水平决定内外毛细胞发育、成熟，但是否同样决定异位毛细胞样细胞发育成熟未得到证实。且异位新生毛细胞样细胞是否会类似发育中的内外毛细胞发生汇聚伸展现象，又与哪些调控因素有关未见文献报道。因此，本研究拟解决如下问题：1)Atohl过表达及Notch通路抑制剂DAPT单独或联合作用新霉素处理后的大鼠基底膜，观察原位区域毛细胞样细胞是否

8、具有差异；2)不同滴度的AdS．EGFP．Atohl作用于体外培养的基底膜，观察小上皮脊异位毛细胞样细胞的数目变化及纤毛发育、成熟。3)Ad5．EGFP．Atohl诱导产生的异位毛细胞样细胞是否具有汇聚伸展现象及其影响因素。方法：本研究以体外培养耳蜗基底膜诱导毛细胞再生为模型。1)取耳蜗中