nm-h基因过表达对口腔鳞癌细胞影响的体外研究

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1、上海交通大学硕士学位论文nm23-h1基因过表达对口腔鳞癌细胞影响的体外研究姓名：杨菲申请学位级别：硕士专业：口腔基础医学指导教师：陈万涛20090501上海交通大学医学院2006级硕士研究生学位论文缩略语表缩写BSADEPCDNAdNTPDTTDMEMDMSOEBEDTAFBSFMGAPDHHRP英文全称BovineSerumAlbuminDiethylPyrocarbonateDeoxyribonucleicAcidDeoxyribonucleosideTriphosphateDithilothreitolDulbecco’sModifiedEagle’sMe

2、diumDimethylSulphoxideEthidiumBromideEthylenediamineTetraaceticAcidFetalBovineSerumFluorescentMicroscopeGlyceraldehyde-3-phosphateDehydrogenaseHorseradishPeroxidase中文全称牛血清白蛋白焦碳酸二乙酸脱氧核糖核酸脱氧核糖核苷三磷酸二硫苏糖醇Dulbecco改良的Eagle培养基二甲基亚砜溴化乙啶乙二胺甲乙酸胎牛血清荧光显微镜甘油醛-3-磷酸脱氢酶辣根过氧化物酶LSCMLaserScanningConfoc

3、alMicroscope激光扫描共聚焦显微镜MTTNDPKnm23ODMethylThiazolylTetrazoliumNucleosideDiphosphateKinaseNon-metastasis23OpticalDensity二甲基噻唑二苯基四唑溴盐核苷二磷酸激酶肿瘤转移抑制基因23光密度值6上海交通大学医学院2006级硕士研究生学位论文缩写OSCCPBSPCRPKC-αRT英文全称OralSquamousCellCarcinomaPhosphateBufferedSalinePolymeraseChainReactionProteinKinaseC

4、-αReverseTranscription中文全称口腔鳞状细胞癌磷酸缓冲液多聚酶链式反应蛋白激酶C-α逆转录反应7上海交通大学医学院2006级硕士研究生学位论文上海交通大学学位论文原创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行研究工作所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。学位论文作者签名：日期：年月日3上海交通大学医学院2006级硕士研究生学位论文上海交通大学学位

5、论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。本人授权上海交通大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。保密□，在本学位论文属于不保密□。（请在以上方框内打“√”）学位论文作者签名：年解密后适用本授权书。指导教师签名：日期：年月日日期：年月日4上海交通大学医学院2006级硕士研究生学位论文nm23-h1基因过表达对口腔鳞癌细胞影响的体外研究摘要目的：探讨nm23-h1基

6、因对口腔鳞癌细胞增殖、侵袭等生物学行为的影响及可能的作用机制。方法：检测6个口腔鳞癌细胞系中nm23-h1的表达水平；挑选nm23-h1表达量最少、报告基因质粒转染效率最高的细胞系，瞬时转染pCMV-nm23-h1质粒，检测转染后细胞的生物学特性：MTT法检测细胞增殖活性、平板克隆形成实验检测克隆形成能力、流式细胞仪检测细胞周期、粘附实验检测细胞粘附能力、小室侵袭实验检测细胞侵袭能力；实时定量PCR检测nm23-h1功能相关基因蛋白激酶C-α的表达、激光共聚焦显微镜检测PKC-α蛋白的亚细胞定位。结果：在Tca8113、Tb、Tca8113M、TSCC、OSC-4、

7、Tca8113/CDDP6个口腔鳞癌细胞系中，高转移细胞系Tb、Tca8113M2个细胞系的nm23-h1表达量最低。Tb细胞转染pCMV-nm23-h1质粒，过表达外源性nm23-h1后，细胞增殖速度、克隆形成率、粘附率和侵袭能力均降低（P<0.05），过表达nm23-h1的Tb细胞PKC-α的mRNA表达量以及细胞膜的PKC-α蛋白表达增多（P<0.05）。8上海交通大学医学院2006级硕士研究生学位论文结论：高转移口腔鳞癌细胞系nm23-h1表达明显降低；这些细胞高表达外源性nm23-h1后，细胞体外增殖和侵袭能力下降。PKC-α蛋白活性增强可能与nm23