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时间:2019-02-27
《新化合物体外抗肿瘤活性及作用机制》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在学术论文-天天文库。
1、万方数据军事医学科学院研究生学位论文独创性声明秉承军事医学科学院严谨的学风和科研作风,本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下独立进行的研究工作和取得的研究成果,除了文中特别加以标注和致谢之处外,论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果,也不包含为获得芏主堕堂登鲎瞳或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。论文作者签字:签字日期:狻2坠年—£月上左日军事医学科学院保护知识产权声明本学位论文作者完全了解茎圭匿堂登堂瞳对研究生在学其间撰写的论文知识产权保护的相关规定。本人撰写的论文是在导师
2、具体指导下,并得到相关研究经费支持下完成,其数据和研究成果归属于导师和作者本人,知识产权单位属芏奎匡堂盘鲎睦。本人保证毕业后,以本论文数据和资料发表论文或使用论文工作成果时署名第一单位仍然为至主匡鲎叠鲎瞳。芏奎堕堂叠堂隆有权保留学位论文及其电子版,通过网站公布论文的全部或部分内容,可以采用影印、缩印或其他复制手段保存论文、汇编以供查阅和借阅。(涉密和延期公开学位论文在解密后适用本声明)论文作者签字:指导教师签字:签字日期:趁2竺年羔二_月上墨日签字日期:垫Z笙年。£月兰芝日万方数据目录英文缩写词表⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯1中文摘
3、要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯3Abstract⋯.⋯⋯.⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯5前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯7材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一l11。材举}⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..111.1细胞及培养条件⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..1l1.2试剂和药品⋯⋯⋯⋯
4、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一lI1.3仪器和耗材⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.121.4化合物和试剂配制⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一122.方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一132.1SRB法检测受试化合物对HepG2,HeLa,A549,HLF及HUVEC细胞增殖的抑制1乍用⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯132.2HCA检测受试化合物相关的细胞形态、毒性及凋亡多参数的变化⋯⋯⋯⋯⋯142.2.
5、1受试化合物对A549细胞核、微丝及微管的影响⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯142.2.2受试化合物对HepG2细胞的线粒体膜电位,氧化应激及核膜通透性等细胞毒性多参数的的影响⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.142。2。3受试化合物对HepG2细胞凋亡参数影晌⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..152.2.4细胞图像多参数分析⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..152.3流式细胞术检测受试化合物对细胞周期的影响⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..152.4微管蛋白结合实验分析受试化合物的与微管蛋白的结合位点⋯⋯⋯⋯⋯⋯一172。4。1微管蛋白制备与鉴定⋯⋯
6、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一172.4.1.1微管蛋白制备⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯172.4.1.2BCA法蛋定量制备的微管蛋白⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一172.4.1.3制备微管蛋白的鉴定⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.172.4.2受试化合物与微管秋水仙碱位点的结合分析⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一182.4.3受试化合物与微管长春碱(VinbIastihe)位点的结合分析⋯⋯⋯⋯⋯⋯182.4,4SDS电泳实验检测受试化合物对微管蛋白酶解产物的影响⋯⋯⋯⋯⋯⋯~182。5受试化合物细胞信号通路作用的筛查⋯⋯
7、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一192.6数据处理⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯~19实验结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.2l1.受试化合物对HepG2,HeLa,A549,HLF及HUVEC细胞增殖的抑制作用⋯⋯⋯⋯.212.受试化合物对细胞形态、线粒体膜电位,氧化应激、核膜通透性及凋亡多参数的影响⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯242.1受试化合物对A549细胞骨架和细胞核的影晌⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯24
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