程序性死亡分子--1信号通路对糖尿病视网膜病变调控机制的研究

《程序性死亡分子--1信号通路对糖尿病视网膜病变调控机制的研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、南方医科大学2011级博士学位论文程序性死亡分子一l信号通路对糖尿病视网膜病变调控机制的研究ThereguIationmechanismofPD一1pathwayindiabeticretinopathy课题来源：国家自然科学基金(30901653)国家自然科学基金(81371031)广东省医学科研基金(B2011013)学位申请人导师姓名专业名称培养类型培养层次所在学院答辩委员会主席答辩委员会委员差东蠢人菱垂院矽兰妨王铮教授∥‘’＼．1杨斌教授，刃小u赫蓁薹少蛾张少冲教授2、也1弋张良主任医师、飘建o2014年5月27日广州博士学位论文程序性死

2、亡分子一1信号通路对糖尿病视网膜病变调控机制的研究博士研究生：方梦园指导教师：郭海科教授摘要研究背景糖尿病视网膜病变(diabeticretinopathy，DR)是目前危害中老年人视力最主要的致盲眼病之一[1】。DR的发生和发展与多种因素相关，如高血糖、氧化应激、糖基化终末产物、细胞凋亡、细胞因子等【2】。近年来许多学者都明确提出免疫机制参与DR的发生发展，DR也是一种自身免疫性疾病[3，41。免疫学发病机制逐渐成为DR的研究热点，主要集中在四个方面：(1)自身抗原和免疫细胞的异常表达诱导DR的自身免疫反应【4．8】；(2)炎症细胞和前炎症因子

3、参与DR的病理过程[9．11】；(3)抗炎药物对DR具有明确的治疗作用㈦12】；(4)免疫遗传因素影响DR的发生【13’14】。综上所述，DR虽然以视网膜微血管病变为病理基础，但却是自身免疫应答、炎症性免疫反应、免疫遗传等在内的多因素多途径综合作用的结果。细胞凋亡和炎症反应是DR的重要病理变化‘15，16】。激活诱导的细胞凋亡参与了细胞免疫状态的维持[17】。免疫反应早期淋巴细胞被激活，进而引起细胞因子和细胞表面分子的变化【18-201，产生炎症反应。辅助性T细胞(helpTcell，Th细胞)是体内一类重要的免疫调节细胞，Th细胞根据分泌细胞因

4、子和功能不同可分为Th0、Thl、Th2、Th3、Thl7亚群，其中Thl细胞主要分泌IFN。扒Th2细胞主要分泌IL．4。Th细胞主要通过调节细胞因子表达量改变免疫状态。探讨摘要DR患者激活诱导细胞凋亡和细胞因子的变化，可以更好的了解DR患者的免疫状态。共刺激信号已经成为免疫学研究的一个热点领域。程序性死亡分子1(programmeddeath一1，PD—1)及其配体(programmeddeath一1igands，PD—Ls)属于CD28／B7家族，PD．1主要表达于活化的T细胞、B细胞；配体PD．L1和PD．L2主要表达于抗原提呈细胞，且P

5、D—Ll的表达更易被激活诱掣211。PD．1通过与PD—Ll、PD．L2的IgV样结构域结合，将信号传至其细胞质区尾部的免疫受体酪氨酸抑制基序，从而抑制T细胞的活化和细胞因子的分泌。PD．1及其配体属于抑制性共刺激分子，其在自身免疫性疾病、器官移植排斥反应、病原微生物感染、肿瘤免疫逃逸等方面都发挥着重要作用盼241。综上所述，免疫机制参与了DR的发生发展，PD一1／，PD—Ls信号通路作为重要的免疫抑制通路，我们推测它可能对DR的发生发展具有调节作用。本课题以DR作为研究主体，以PD．1信号通路作为研究对象，以外周血作为研究靶点，从激活诱导的细胞

6、凋亡和Thl／Th2类细胞因子出发，观察PD．1信号通路在糖尿病视网膜病变患者中的表达及功能特点，探讨PD—l／PD—Ls信号通路在DR发病机制中的作用，以期为DR的发病机制提供新的理论依据，为此类疾病的预防和和治疗提供新的思路和方法。第一部分程序性死亡分子1及其配体在糖尿病视网膜病变患者外周血中的表达目的：探讨PD一1及其配体PD—Ll和PD．L2在2型糖尿病视网膜病变患者外周血淋巴细胞中的表达和意义。方法：临床检查确诊为增殖性糖尿病视网膜病变患者(proliferativediabeticretinopathy，PDR)41例，非增殖性糖尿病

7、视网膜病变患者(nonprolif．erativediabeticretinopathy，NPDR)28例，糖尿病无视网膜病变患者(diabetesmellitusandnodiabeticretinopathy，DM．NDR)27例，同期行体检的健康志愿者59例纳博士学位论文入研究。收集受检者晨起空腹EDTA静脉抗凝血2mI，采用实时定量聚合酶链式反应(Realtimepolymerasechainreaction，RT．PCR)检测PD．1、PD—L1、PD—L2111]}斟A的表达水平，分析各组间表达水平的差异。结果：I汀．PCR检测结果显

8、示，PDR患者外周血淋巴细胞PD．1、PD．L1mIⅢA相对表达量比DM—NDR组及对照组降低，差异有统计学意义(PD．1：P=O．00