大肠杆菌内源性非编码rna oxys对秀丽线虫che-2基因表达与行为的调控

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1、分类号学号M200975874学校代码10487密级硕士学位论文大肠杆菌内源性非编码RNAOxyS对秀丽线虫che-2基因表达与行为的调控学位申请人：吴金晶学科专业：麻醉学指导老师：王学仁副教授答辩日期：2012年4月AdissertationsubmittedtoHuazhongUniversityofScienceandTechnologyfortheDegreeofMasterofMedicineRegulationofC.elegansgeneandbehaviorbyanendogenousE.colinoncodin

2、gRNAOxySCandidate:JinjingWuMajor:AnesthesiologySupervisor:Dr.XuerenWangTongjiHospital,TongjiMedicalCollege,HuazhongUniversityofScienceandTechnologyWuhan,Hubei430030,P.R.ChinaApril,2012独创性声明本人郑重声明，本学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果的总结。尽我所知，除文中已经标明引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表

3、或撰写过的研究成果。对本文的研究做出贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。本人完全意识到本人将承担本声明引起的一切法律后果。学位论文作者签名：日期：年月日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。本人授权华中科技大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。保密□，在年解密后使用本授权书。本论文属于不保密□。（请在以上方框内打“√”）

4、学位论文作者签名：指导老师签名：日期：年月日日期：年月日目录中文摘要························································1ABSTRACT························································4前言·························································7材料与方法··············································

5、·······8结果·························································21讨论·························································29结论·························································33参考文献·······················································34综述·············

6、···············································37参考文献·······················································43致谢·························································45华中科技大学硕士学位论文大肠杆菌内源性非编码RNAOxyS对秀丽线虫che-2基因表达与行为的调控硕士研究生：吴金晶指导老师：王学仁副教授华中科技大学同济医学院附属同济医院麻醉学教研室中文摘要

7、目的：研究大肠杆菌内源性非编码RNAOxyS对取食大肠杆菌的秀丽线虫化学感受基因che-2的表达和秀丽线虫行为的调控，以及这种调控作用的分子机理。方法：通过秀丽线虫行为学实验分析大肠杆菌内源性非编码RNAOxyS对秀丽线虫行为的影响；逆转录PCR(PolymeraseChainReaction，聚合酶链反应)和实时定量PCR分别对秀丽线虫的化学感受基因che-2的mRNA表达进行半定量和定量的对比；通过蛋白质印迹（WesternBlot）对秀丽线虫的CHE-2::GFP蛋白进行定量对比；使用共聚焦显微镜对秀丽线虫体内具有荧光标记

8、的che-2基因时空表达进行成像研究。结果：1.食物竞争实验：OxyR和OxyS细菌上的野生型秀丽线虫N2的线虫数量随着时间逐渐减少，而ΔOxyS细菌上的线虫数量无明显变化。OxyS细菌上减少的线虫数量多于OxyR细菌。食物寻找能力实验：90min内95%的野生