大肠杆菌内源性非编码rna dsra对秀丽线虫基因的调控作用

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1、分类号学号M200975877学校代码10487密级硕士学位论文大肠杆菌内源性非编码RNADsrA对秀丽线虫基因的调控作用学位申请人：任婧学科专业：麻醉学指导老师：王学仁副教授答辩日期：2012年4月AdissertationsubmittedtoHuazhongUniversityofScienceandTechnologyfortheDegreeofMasterofMedicineRegulationofC.elegansgenebyendogenousE.colinoncodingRNADsrACandidate:JingRenMajor:AnesthesiologySup

2、ervisor:Dr.XuerenWangTongjiHospital,TongjiMedicalCollegeHuazhongUniversityofScienceandTechnologyWuhan,Hubei430030,P.R.ChinaApril,2012独创性声明本人郑重声明，本学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果的总结。尽我所知，除文中已经标明引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的研究成果。对本文的研究做出贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。本人完全意识到本人将承担本声明引起的一切法律后果。学位论文作者签名：日期：

3、年月日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。本人授权华中科技大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。保密□，在年解密后使用本授权书。本论文属于不保密□。（请在以上方框内打“√”）学位论文作者签名：指导老师签名：日期：年月日日期：年月日目录中文摘要.....................................1ABSTRACT.......................

4、..............3前言......................................5材料与方法...................................7结果.....................................19讨论.....................................25结论.....................................29参考文献....................................30综述.............................

5、........32参考文献....................................37致谢....................................41华中科技大学硕士学位论文大肠杆菌内源性非编码RNADsrA对秀丽线虫基因的调控作用硕士研究生：任婧导师：王学仁副教授华中科技大学同济医学院附属同济医院麻醉学教研室中文摘要目的：通过观察表达DsrA的大肠杆菌对秀丽线虫寿命的影响，来研究大肠杆菌内源性非编码RNA对秀丽线虫基因的调控作用，进一步探讨非编码RNA的调控途径以及其在物种之间的作用。方法：用野生型大肠杆菌K12和DsrA突变的大肠杆菌（NM6

6、003或DDS719）分别培养秀丽线虫，通过寿命实验观察11种秀丽线虫（N2，dcr-1，rde-1，rde-2，rde-4，alg-1，alg-2，rrf-3，eri-3，tm3026，tm2908）的寿命。利用半定量逆转录PCR（PolymeraseChainReaction）和实时定量PCR观察DsrARNA对秀丽线虫mRNA水平的影响，进一步观察RNA干扰（RNAinterference，RNAi）相关基因对DsrARNA这种调控作用的影响。给予转基因秀丽线虫注射DsrARNA后使用共聚焦显微镜观察F42G9.6::GFP的荧光表达变化。还通过秀丽线虫与大肠杆菌相互作用的

7、长期实验探究DsrA在大肠杆菌和秀丽线虫之间的作用。结果：1.以DsrA缺失突变的大肠杆菌（NM6003或DDS719）为食的秀丽线虫N2寿命长于用野生型大肠杆菌K12喂食者（P＜0.01）。2.F42G9.6突变的秀丽线虫（tm2908）在两种不同的食物野生型大肠杆菌K12和DsrA缺失突变的大肠杆菌上生长时，秀丽线虫的寿命无差异；在同样的大肠杆菌K12上的生存时间，秀丽线虫tm2908短于秀丽线虫N2（P＜0.05）。1华中科技大学硕士学位论文3.用大肠杆菌K12和DsrA突