地氟醚预处理调节内皮细胞nf-kb振荡

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1、万方数据复旦大学硕士学位论文後旦大学硕士学位论文学校代码：10246学号：09211210028地氟醚预处理调节内皮细胞NF-KB振荡一fluranepreconditioninginducesoscillationofNF-KBDestlUraneindUcesoscillationNFKBDreC0nnltlonlng-inendothelialcells系：复旦大学附属中山医院业：麻醉学名：易娟指导教师：朱彪副教授完成曰期：2012年4月22日本课题承2009年度国家自然科学基金项目资助院专姓万方数据复旦大学硕士学位论文目录中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

2、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯i英文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯3引言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯5第一部分地氟醚预处理对脐静脉内皮细胞缺氧／复氧损伤的保护作用⋯⋯⋯⋯7材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯7结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯。11讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯。14第二部分地氟醚预处理引起脐静脉内皮细胞转录因子NF—KB振荡和抗凋亡蛋白产生⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

3、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯。16材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．16结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．19讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．27参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．30致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．34文献综述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．35附录⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

4、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．42英文缩略语⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．42万方数据复旦大学硕士学位论文地氟醚预处理调节内皮细胞NF．KB振荡中文摘要第一部分地氟醚预处理对脐静脉内皮细胞缺氧／复氧损伤的保护作用目的：分离培养原代人脐静脉内皮细胞(humanumbilicalveinendothelialceils，HUVECs)，研究地氟醚预处理对HUVECs缺氧／复氧损伤所起的保护作用。方法：采用胶原酶灌注消化法分离培养HUVECs，以Ⅷ因子相关抗原免疫荧光方法进行鉴定。将细胞分为三组：对照组(CoN组)，缺氧／复氧组(A／R组)和地氟醚预处理

5、组(DesPC组)，DesPC组在缺氧／复氧损伤前先给予30分钟I～IAC地氟醚处理。用异硫氰酸荧光素标记的重组膜粘连蛋白一5(AnnexinV-FITC)和碘化丙啶(PI)标记，流式细胞仪计数凋亡细胞，四甲基偶氮唑盐(MTT)法测定细胞存活率，采用WST-1(water—solubletetrazoliumsalt)法测定细胞内超氧化物歧化酶(SOD)活力。结果：原代HUVECs生长5—7天后呈单层铺路石样排列，细胞为扁平多角形，Ⅷ因子相关抗原检测为阳性。A／R组细胞凋亡率(35．73±5．43％，均数±标准差)与CON组(23．62±4．56％)相比明显增加，经过地氟醚

6、预处理后，DesPC组细胞凋亡(27．39±3．22％)较A／R组明显下降。DesPC组细胞存活率(96．58±6．25％)明显高于A／R组(86．25±3．6l％)。A／R组细胞内SOD活力(23．55±7．84U／mgprotein)较CON组(38．86±6．40U／mgprotein)降低，DesPC组SOD活力(35．49±9．36U／mgprotein)与A／R组相比明显增加。结论：本实验成功培养出原代HUVECs，建立了体外缺氧／复氧模型。地氟醚预处理抑制脐静脉内皮细胞缺氧／复氧引起的细胞凋亡，保存细胞内超氧化物歧化酶活性，从而具有一定的抗缺氧／复氧损伤效应。

7、关键词：地氟醚；预处理：缺氧／复氧；脐静脉内皮细胞万方数据复旦大学硕士学位论文第二部分地氟醚预处理引起脐静脉内皮细胞转录因子NF．KB振荡和抗凋亡蛋白产生目的：转录因子NF-KB参与调节吸入麻醉药物预处理引起的缺氧／复氧损伤保护作用。探讨地氟醚预处理对HUVECsNF-KB以及凋亡相关蛋白表达的影响，以明确地氟醚预处理对缺氧／复氧损伤的保护机制。方法：选用原代培养的HUVECs，将细胞分成6组：对照组(CoN组)，地氟醚组(DES组)，缺氧／复氧组(A／R组)，地氟醚预处理组(DesPC组)，BAY+DesPC组和