热变性法分离纯化羊血sod工艺优化 毕业论文

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1、本科毕业论文论文题目热变性法分离纯化羊血SOD工艺优化学院生命科学技术学院专业生物技术（动物方向）毕业届别2011届姓名指导教师职称甘肃农业大学教务处制二〇一一年六月13目录1材料与方法21.1实验材料…..21.2实验仪器与药品..31.2.1实验仪器31.2.2实验药品…………..31.3实验方法31.3.1SOD的提取.31.3.2蛋白质含量测定………..…31.3.2.1绘制标准曲线……..41.3.2.2样品测定41.3.3SOD酶活力测定…..41.3.4单因素试验设计..41.3.5正交试验设计

2、....51.3.6试验数据处理62结果与分析62.1蛋白质标准曲线…………..…………………….62.2单因素实验结果与分析62.2.1热变性温度对SOD提取的影响.62.2.2热变性时间对SOD提取的影响.62.2.3Cu2+浓度对SOD提取的影响72.2.4丙酮添加量对SOD提取的影响72.3正交试验结果与分析..82.4验证试验结果103结论..10参考文献11英文摘要12致谢1213热变性法分离纯化羊血SOD工艺优化孔志亮（甘肃农业大学生命科学技术学院兰州730070）摘要：本实验以羊血为原料通过溶

3、血、热处理、离心、沉淀等方法获得SOD提取物，采用单因素试验和正交试验，对影响SOD比活力的主要因素进行研究。结果表明，热变性法适宜分离纯化羊血SOD，优化的最优工艺条件为：热变性温度为65℃，热变性时间为15min，Cu2+浓度为2.6%，丙酮添加量为1.25倍。在此条件下得到的SOD提取物的活力为184.8U/mL，蛋白质含量为79μg/mL，比活力为2338.9U/mg。此方法操作简单，成本低，适合工厂化生产。关键词：羊血；SOD；酶活性；热变性OptimizationofExtractingTechn

4、ologyofSODfromSheepBloodbyHeatingDenaturationMethodKongZhi-liang(CollegeofLifeScience&Technology,GansuAgriculturalUniversity,Lanzhou730070)Abstract：SODwasextractedbyhematolysis,heatingdenaturation,centrifugalforceandprecipitationfromsheepbloodasrawmaterial.

5、ThemainfactorsthatinfluencetheyieldandvitalityofSODwereresearchedbysinglefactorandorthogonaltests.Theresultsshowedthatthebestconditionwas65℃ofheatingtemperature,15minofheatingdenaturationtime,2.6%ofCu2+,1.25timesofacetone.Onthecondition,therelativeactivityo

6、fSODwas2338.9U/mg.Theseprocessesaresimpleandinexpensiveandcanbeappliedtoindustrializedproduction.Keywords：Sheepblood;SOD;Enzymeactivity;Heatingdenaturation超氧化物歧化酶(Superoxidedismutase，SOD)是广泛存在于生物体内的一种金属酶[1]，可催化超氧阴离子(O2-)与H+发生歧化反应，生成H2O2和H2O，从而使机体抵御O2-的毒害作用[

7、2]。SOD具有抗氧化、抗炎症、抗辐射、抗肿瘤和抗衰老等功能，被誉为“人体内垃圾清道夫”，在化妆品、食品、医药等领域有着广泛的应用价值[3]。13自1969年McCord和Fridovich首次从牛红细胞中发现SOD以来，人们相继从猪、羊、马等动物红细胞、肌肉、肝脏组织以及植物中分离和纯化出SOD，并对其理化性质进行了研究，结果证实哺乳动物血液中SOD含量和效价最高[4,5,6]。甘肃作为羊肉生产和消费的大省，具有丰富的羊血资源。如果能够充分利用其开发天然SOD，必将带来巨大的经济价值和社会效益[7]。在现有

8、的动物血液SOD纯化工艺中，使用了大量的有机溶剂（如氯仿，乙醇等），这些有毒有害物质回收非常困难，既增加了环保压力又提高了产品成本，使得SOD产品的成本和产量一直难以达到理想水平[8]。因此，建立经济、高效、环保的分离纯化工艺是羊血SOD规模化生产急需解决的关键问题。本文利用热变性法从羊血中提取SOD，并对分离纯化工艺进行优化研究，以期建立较为安全、高效的技术路线，为羊血资源的大规模开发利用奠定基础