线粒体膜通透性转换孔在慢性低氧肺动脉高压中的作用及机制

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1、温州医学院硕士学位论文线粒体膜通透性转换孔在慢性低氧肺动脉高压中的作用及机制姓名：刘艳玲申请学位级别：硕士专业：内科学指导教师：徐红蕾2012-05-19温州医学院硕士学位论文线粒体膜通透性转换孔在慢性低氧肺动脉高压中的作用及机制中文摘要目的研究线粒体膜通透转换孔(MPTP)对氧自由基及肺动脉平滑肌细胞增殖凋亡失衡的影响。方法培养SD大鼠肺动脉平滑肌细胞，并将细胞分成7组：A组：正常对照(21％0：，5％CO：，24h)B组：MPTP的开放剂苍术苷(atractylosideATR)(21％0：，5％CO：，24h，苍术苷终浓度：20uM)C组：MPTP的阻滞剂环孢菌素(cyc

2、losporinACSA)(21％02，5％C02，24h，环孢菌素A终浓度：0．2uM)D组：缺氧(5％0。，5％CO。，24h)E组：缺氧组+ATR(5％0。，5％CO。，24h，苍术苷终浓度：20uM)F组：缺氧组+CSA(5％0。，5％C0。，24h，环孢菌素终浓度：0．2uM))G组：缺氧组+氧自由基清除剂2一巯基丙酰氨基乙酸(mercapto—propionyl—glycin，mpg)(5％0。，5％CO。，24h，mpg终浓度：400uM))，每次实验前均用无血清DMEM培养基饥饿24小时使细胞同步化，实验重复6次。利用酯化钙黄绿素荧光法检测各组PASMCs的MP

3、TP的开放情况，利用流式细胞术检测各组PASMCs细胞内氧自由基含量，CCK-8法检测细胞活性情况。结果1．ATR组的细胞线粒体膜通透性转换孔的开放情况(以酯化钙黄绿素的荧光强度表示)与正常组比较有统计学意义(PO．05)；缺氧组与正常组比较有统计学意义(P<0．05)；缺氧组+ATR、缺氧组+CSA、缺氧组+mpg组的细胞线粒体膜通透性转换孔的开放情况与缺氧组比较，差异有统计学意义(P

4、荧光强度减弱。2．ATR组的肺动脉平滑肌细胞内氧自由基情况(以DCFH—DA的荧光强度表示)与正常组比较有统计学意义(P0．05)；缺氧组与正常组比较有统计学意义(P<0．05)；缺氧组+ATR、缺氧组+CSA、缺氧组+mpg组的细胞内氧自由基情况与缺氧组比较，差异有统计学意义(P

5、意义(P0．05)；缺氧组与正常组比较有统计学意义(P<0．05)；缺氧组+ATR、缺氧组+CSA、缺氧组+mpg组的细胞活性情况与D缺氧组比较，差异有统计学意义(P均

6、粒体途径脉高压肺动脉平滑肌细胞增殖凋亡失衡最终导致肺动脉高压的重要机制之一。3．低氧条件下肺动脉平滑肌细胞线粒体膜通透性转换孔的开放情况和氧自由基含量的变化可能发挥协同作用是导致肺动脉平滑肌细胞增殖凋亡失衡的重要机制之一。【关键词】肺动脉平滑肌细胞；低氧；线粒体线粒体膜通透性转换孔；氧自由基温州医学院硕士学位论文Theef诧ctandmechanismofmitochondrialmembranepermeabilitytransitionDoreothyl90xic19ulmonarybypertenslon一-工·-‘，一一AbstractObjectiveToinvest

7、igatethecontributionofmitochondrialmembranepermeabilitytransitionpore(MPTP)tochangesofreactiveoxygenspecies(ROS)andtotheimbalanceofproliferationlapoptosisofpulmonaryarterialsmoothmusclecells(HPASMC)．MethodsCultivatingpulmonaryarterialsmoothmusclece