人参皂苷rh2对人肝癌bel-7402细胞增殖和凋亡的影响

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1、分类号UDC610硕士学位论文密级人参皂苷Rh2对人肝癌Beb7402细胞增殖和凋亡的影响EffectsofginsenosideRhzontheproliferationandapoptosisofhumanhepatocarcinomacellsBel·-7402作者姓名：何鑫学科专业：外科学学院(系、所)：卫生部肝胆肠外科研究中心指导教师：何剪太教授答辩委员会主御中南大学二O一二年六月原创性声明本人声明，所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除了论文中特别

2、加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得中南大学或其他单位的学位或证书而使用过的材料。与我共同工作的同志对本研究所作的贡献均已在论文中作了明确的说明。作者签名：丝型逸日期：业年』月』日学位论文版权使用授权书本人了解中南大学有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权保留学位论文并根据国家或湖南省有关部门规定送交学位论文，允许学位论文被查阅和借阅；学校可以公布学位论文的全部或部分内容，可以采用复印、缩印或其它手段保存学位论文。同时授权中国科学技术信息研究所将本

3、学位论文收录到《中国学位论文全文数据库》，并通过网络向社会公众提供信息服务。日期：至坐年—L月上日硕士学位论文中文摘要摘要目的：观察人参皂苷Rh：对人肝癌Bei-7402细胞增殖和凋亡的影响，探讨其机制，为肝癌相关的新药研发和临床治疗提供理论依据。方法：将人肝癌Bei-7402细胞用含10％胎牛血清的高糖DMEM培养基，在37℃、5％C0：培养箱中培养。每2天换液一次，细胞生长至80％时用胰蛋白酶进行消化传代。取对数生长期的人肝癌Bel一7402细胞与人参皂苷Rh2(200、100、50、0ug·m

4、l。1)在37℃、5％C0。培养箱中培养48h，应用MTT比色法，通过应用酶联免疫检测仪在490nm波长处测定其光吸收值并计算细胞生长抑制率，从而间接反映人参皂苷Rh。对人肝癌Bel一7402细胞增殖的影响；利用流式细胞仪分析人肝癌Bei-7402细胞周期中各时期的细胞百分数；应用TUNEL技术，利用荧光显微镜，在450-500nm波长范围激发荧光，并以细胞核出现强烈荧光作为判断TUNEL阳性细胞的标准，计算细胞凋亡率，从而反映人参皂苷Rh：对人肝癌Bel一7402细胞凋亡的影响；通过Western

5、blot法检测人肝癌Bel一7402细胞中Bcl一2、Bax的蛋白表达。结果：MTT比色法结果显示，将不同浓度的人参皂苷Rh2(200、100、50ugoml‘1)与人肝癌Bei-7402细胞共培养48h后，与阴性对照组比较细胞增殖抑制率分别为：30．25±1．29％、14．14±1．17％、8．27±1．02％，说明人参皂苷Rh：能抑制人肝癌Bei-7402细胞的生长，且在一定程度上呈量效关系；流式细胞仪检测显示，人参皂苷Rh。(200、100、50ug·ml叫)能使细胞停滞于G1期，百分比分别为

6、：79．3±1．10％、71．2±1．47％、66．1±1．22％，在一定程度上呈量效关系；TUNEL技术检测结果显示，人参皂苷Rh。(200、i00、50ug·m1。1)能有效诱导人肝癌Bel一7402细胞凋亡，凋亡率分别为14．32±1．11％、8．14±1．21％、5．28±1．09％，在一定程度上呈量效关系。WesternBlot结果显示，人参皂苷Rh。能上调人肝癌Bei-7402细胞中Bax的表达，下调Bcl一2的表达，在一定程度上呈量效关系。结论：与阴性对照组相比，用不同浓度的人参皂苷R

7、h：处理人肝癌Bel一7402细胞48h后，细胞中具有抗凋亡作用的Bcl一2表达下降，硕士学位论文中文摘要而促凋亡的Bax表达升高，这也引起了Bcl一2／Bax比值降低。本实验结果提示人参皂苷Rh。诱导人肝癌Bel一7402细胞凋亡的作用可能是通过影响Bax、Bcl一2表达来实现的。人参皂苷Rh。能有效抑制人肝癌Bel一7402细胞的增殖，并能诱导其凋亡，因而在临床治疗肝癌方面有广泛的应用前景。进一步证明了其作用机制至少涉及两方面内容，一是细胞周期阻滞，二是Bel-2和Bax参与调控的细胞凋亡。关键

8、词人参皂苷Rh：，人肝癌Bel-7402细胞，增殖，凋亡II硕士学位论文英文摘要ABSTRACT【Objective】ToinvestigatetheeffectsofginsenosideRh2ontheproliferationandapoptosisofhumanlivercancercellsBel．7402．『MethodslHumanhepatomaBel一7402cellsweretreatedwithDMEMmediumcontaining1O％fet