耳针激活胆碱能抗炎通路抑制糖尿病血管并发症炎症反应机制研究

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1、分类号R96密级公开UDC硕士学位论文耳针激活胆碱能抗炎通路抑制糖尿病血管并发症炎症反应机制研究学位申请人：曾永保学科专业：药理学指导教师：梅志刚副教授二○一二年五月ADissertationSubmittedinPartialFulfillmentoftheRequirementsfortheDegreeofMasterofMedicineInvestigationofAuricularAcupuncturePointsinRegulationofDiabeticVascularComplicationsandInflammatoryRea

2、ction:AStudyBasedontheCholinergicAnti-inflammatoryPathwayGraduateStudent:ZengYongbaoMajor:PharmacologySupervisor:Assco.ProfMeiZhigangChinaThreeGorgesUniversityYichang,443002,P.R.ChinaMay,2012三峡大学硕士学位论文三峡大学学位论文原创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行研究工作所取得的成果，除文中已经注明引用的内容外，本论文不

3、含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体均已在文中以明确方式标明，本人完全意识到本声明的法律后果由本人承担。学位论文作者签名：日期：三峡大学研究生知识产权承诺书本人承认：我作为三峡大学硕士研究生在校学习期间，在导师指导下，依据研究工作所作学位论文的知识产权全部权归三峡大学所有。本人承诺：我有义务维护三峡大学的知识产权，凡是以我本人学位论文内的全部或部分研究成果，或实验数据为基础所形成的研究论文及成果，无论是以何种形式刊发学术论文、进行成果鉴定或申报奖励，均以三峡大学为第一作者单位或完成单位，并事先征

4、得导师或学校相关部门的同意。我愿承担因违背上述承诺而引起的一切法津和经济后果。学位论文作者签名：日期：I三峡大学硕士学位论文内容摘要目的：观察耳甲区穴位刺激对2型糖尿病模型大鼠血清炎症因子和胰岛素抵抗指数的调节作用，探讨耳针穴位刺激抑制糖尿病炎症血管并发症的胆碱能抗炎作用机制，揭示传统中医学耳疗作用的科学内涵，为临床防治糖尿病及其并发症提供新的干预方法和策略参考。方法：(1)从80只大鼠中随机抽取10只作组1（正常组），以正常饲料喂养；其余70只采用高脂高糖加链脲佐菌素诱导建立2型糖尿病大鼠模型；(2)将造模成功的43只大鼠分为：组2（模型组

5、）、组3（耳针组）、组4（迷走神经切断组）、组5（阿托品组）、组6（六烃季铵组）、组7（α-银环蛇毒素组）；各组分别作如下处理：组2不作处理，仅作模型对照；组3电针刺激耳甲CO11穴位，每次30分，连续10天；组4-7予以组3相同的耳针刺激，但组4耳针刺激前离断耳针刺激同侧颈部迷走神经，组5、6、7耳针刺激前分别尾静脉注射阿托品、六烃季铵、α-银环蛇毒素；(3)最后一次耳针刺激前禁食12h，针刺结束后立即麻醉大鼠、腹主动脉取血、离心取血清，酶联免疫吸附法检测血清炎症因子TNF-α、IL-6、CRP和IL-10水平；(4)血糖试纸测定各组大鼠空

6、腹血糖（FPG），酶联免疫吸附法检测各组大鼠血清胰岛素水平（FINS），计算胰岛素抵抗指数[HOMA-IR=(FINS×FPG)/22.5]；并采用皮尔森积矩相关系数法分析模型组中炎症因子浓度水平与HOMA-IR之间的线性相关关系；(5)最后一次耳针刺激结束后，各组分别取2只大鼠灌注固定大脑组织，开颅分离海马，采用透射电镜观察海马区脑微血管炎症损伤情况；结果：(1)模型组大鼠胰岛素抵抗指数和促炎因子TNF-α，IL-6，CRP水平均较正常组显著升高，但抗炎因子IL-10水平显著降低；促炎因子TNF-α，IL-6，CRP水平与HOMA-IR之间

7、呈正相关关系，抗炎因子IL-10水平与HOMA-IR之间呈负相关关系；(2)耳针刺激CO11穴位后可显著降低异常增加的TNF-α，IL-6，CRP水平，升高明显减低的IL-10水平，减低胰岛素抵抗指数；(3)耳针刺激前离断针刺侧颈部迷走神经或尾静脉注射六烃季铵，α-银环蛇毒素均可抵消耳针调节炎症因子的效应，但耳针刺激前尾静脉注射阿托品对耳针效应无明显影响；(4)模型组大鼠海马区毛细血管炎症损伤明显，基底膜较正常组显著增厚，水肿；耳针组大鼠海马区微血管基底膜水肿，增厚程度较模型组明显减小；II三峡大学硕士学位论文(5)耳针刺激前离断针刺侧颈部迷

8、走神经或尾静脉注射六烃季铵，α-银环蛇毒素均可抵消耳针保护海马区微血管的效应，但耳针刺激前尾静脉注射阿托品对耳针效应无明显影响。结论：(1)促炎因子的异常升高和抗炎