利用兔左心室冠脉灌流楔形标本评价herg钾通道开放剂的抗心律失常作用

《利用兔左心室冠脉灌流楔形标本评价herg钾通道开放剂的抗心律失常作用》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、河北医科大学硕士学位论文利用兔左心室冠脉灌流楔形标本评价hERG钾通道开放剂的抗心律失常作用姓名：邱博申请学位级别：硕士专业：药理学指导教师：许彦芳201203中文摘要利用兔左心室冠脉灌流楔形标本评价hERG钾通道开放剂的抗心律失常作用摘要心肌细胞膜上各种离子通道有序的开放和关闭是心脏正常电活动的基础，动作电位形状、时程取决于去极化和复极化离子流之间相互的精细平衡。二旦这种平衡被打破，复极过程中外向电流的减小或者内向电流的增大均可导致心肌复极的延迟。其中，由humanether-a-go-go—related(hERG)基因编码的钾

2、通道在动作电位复极化过程中发挥关键作用，鉴于这种由心肌复极延迟导致的长QT综合症(LQTS)，为降低新药研发风险，各制药企业更加注重药物对hERG通道影响的筛选，在此过程中发现了一些化合物具有激活hERG通道的作用。近几年的研究表明，可引发LQTS的药物最主要的原因是这些药物具有阻断hERG通道的作用，hERG通道在动作电位复极化过程中发挥重要作用，但是由于心室肌各层细胞hERG通道分布密度的不同，心肌细胞复极结束时间有所不同，心室肌细胞的这种跨壁复极的不均一性称之为跨壁复极离散度(transmuraldispersionofrep

3、olarization，TDR)。药物与通道的结合阻断通道，减少复极电流，动作电位复极延迟易发早后除极(EAD)，引发触发活动。而药物不同程度延迟心肌复极，导致TDR的增大为异常兴奋的折返提供了条件，出现室性快速性心律失常，特别是尖端扭转性室性心动过速(TorsadesdePointes，TdP)，TdP很容易转为室颤而致猝死。试验表明，hERG通道激活剂通过对通道不同机制的调控增加hERG电流、缩短心室肌细胞动作电位时程(APD)，提示，hERG通道激活剂有望成为对抗药物诱发特别是药物阻断hERG通道所致LQTS的特异性治疗药物。

4、本实验采用的bERG通道激活剂ICA．105574(ICA)通过与通道结合，抑制hERG通道的失活过程，从而增大电流强度加速心肌复极。然而关于ICA是否能够对抗药物诱发的EAD和Tdp以及其自身是否具有潜在的致心律失常作用的报导不多。“兔左心室冠脉灌流楔形标本模型"能够同步记录心内膜下心肌细胞中文摘要的动作电位和跨壁心电图，能同时反映APD、TDR及ECG的变化。因此本实验拟利用“兔左室冠脉灌流楔形标本模型”观察bERG通道激活剂对APD、TDR及ECG的影响，了解hERG通道激活剂对组织水平作用的电生理特点。观察hERG通道激活剂

5、对常见的药物(莫西沙星、多非利特)诱发EAD、TdP的影响，实验结果将对hERG通道激活剂潜在的临床应用提供依据。一hERG通道激活剂ICA对正常心肌电生理的影响目的：观察激活剂ICA对家兔正常心肌组织APD和TDR的影响方法：体重2．0-2．5蜒，兔龄3~4个月的健康雌性新西兰兔，耳缘静脉注射肝素(600～800IU／kg)抗凝，10～15分钟后静脉注射戊巴比妥钠(30～35mg／kg)麻醉，开胸迅速取出一tl,脏，放入4℃低温台式液中，以低温停跳液(KCI为24mmol／L、不含Ca2+的台氏液)从主动脉逆行灌流冲洗冠状动脉内残

6、留血液并使心脏停跳。将静脉留置针头经主动脉左窦开口处插入冠状动脉左侧回旋支，用缝合线结扎固定，之后迅速剪去未灌流部位心肌(灌流的心肌部分呈浅粉色，未灌流的心肌部分呈红色)，制成左心室动脉灌流楔形标本。利用“离体兔冠脉灌流心室楔状标本”记录心肌内膜下细胞动作电位时程复极90％的时间(APD90)和跨壁心电图(ECG)，观察在1IJxnol／L，5“rnol／L，10lamol／L浓度下ICA对APD90的影响，以及给予10gmol／LICA前后不同刺激频率下(O．2Hz，1Hz，2Hz)APD90和Tp．e(为T波的峰值与T波终点之间

7、的时程，一般认为该时程间接反映跨壁复极离散度)的变化结果：(1)ICA(10p．mol／L)对内，外膜下心肌细胞的APD90缩短百分率分别为45．5％和34．6％，可见ICA对内膜下心肌细胞APD90缩短更为显著，故实验均同步记录内膜下心肌细胞动作电位和ECG。(2)O．5Hz刺激频率下，1grnol／L，5阻nol／L，10lamogLICA分别缩短心肌内膜下细胞APD9010．4％，21．8％，40：8％。(3)给予10grnol／LICA后在0．2Hz，1Hz，2Hz的频率下分别刺激，APD90的缩短率分别为34．2％，18．

8、4％，17．7％，在给予ICA前后Tp．e由864-5ms变化到83土8ms，无明显变化。(4)10grnol／LICA，2HZ刺激频率下能够诱发EAD，发生率为4／6。中文摘要结论：ICA对内膜下心肌细胞APD90缩短更为显著，可浓