lif对小鼠视网膜光感受器视锥细胞的神经保护作用及其机制研究

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1、分类号VDC博士学位论文密级LIF对小鼠视网膜光感受器视锥细胞的神经保护作用及其机制研究TheneuroprotectiveeffectofLIFonmouseretinalC0neohotoreceotorandtlleunderlylngmecIIanism_●--l●-■作者姓名：董淑倩学科专业：眼科学学院(系、所)：湘雅医院指导教师：刘双珍教授论文答辩日期丝丝：至：乡答辩委员会主中南大学二0一二年五月原创性声明本人声明，所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除了论文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经

2、发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得中南大学或其他单位的学位或证书而使用过的材料。与我共同工作的同志对本研究所作的贡献均己在论文中作了明确的说明。作者签名：童盎盔日期：坐年三月丑日学位论文版权使用授权书本人了解中南大学有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权保留学位论文并根据国家或湖南省有关部门规定送交学位论文，允许学位论文被查阅和借阅；学校可以公布学位论文的全部或部分内容，可以采用复印、缩印或其它手段保存学位论文。同时授权中国科学技术信息研究所将本学位论文收录到《中国学位论文全文数据库》，并通过网络向社会公众提供信息服务。作者签名：釜盘磕导师签名——日期：

3、型缉互月卑日博士学位论文中文摘要第1章LIF在小鼠视网膜光损伤模型中对视网膜光感受器视锥细胞的保护作用目的建立小鼠视网膜光损伤模型，探讨白血病抑制因子(1euke-miainhibitoryfactor，LIF)对小鼠视网膜光感受器视锥细胞光损伤的影响。方法采用50001ux白色冷光源对BALB／c小鼠进行6h(下午6：00到凌晨12：00)持续照射，建立小鼠视网膜光损伤模型。30只小鼠分为五组：①正常对照组10只、玻璃体腔注药组10只(②右眼为玻璃体腔LIF注药组；③左眼为玻璃体腔PBS注药组)和光损伤+玻璃体腔注药组10只(④右眼为光损伤+玻璃体腔LIF注药

4、组；⑤左眼为光损伤+玻璃体腔PBS注药组)。光照前2d给予玻璃体腔注药，右眼玻璃体腔LIF(O．4肛∥p1，lI．t1)注药，左眼玻璃体腔PBS(O．01M，lpl)平衡缓冲液注射(作为自身对照)。(1)光照后7天，视网膜电流图(electroretinogram，ERG)检查分别采用白光、绿光及蓝光三种不同光刺激对视网膜光感受器视锥细胞的功能进行检测；(2)ERG检查后，运用免疫荧光组织化学通过M视锥细胞和S视锥细胞特异性标志蛋白M-opsin和S-opsin对视网膜光感受器视锥细胞的数量和形态进行检测。结果(1)在白光、绿光及蓝光刺激下，与正常对照组ERGb

5、波振幅相比，玻璃体腔LIF注药组和玻璃体腔PBS注药组均无明显变化，其差异无统计学意义(矿O．05)；光损伤+玻璃体腔LIF注药I‘，博士学位论文中文摘要组和光损伤+玻璃体腔PBS注药组均明显下降，其差异有统计学意义(p

6、in的数量均明显下降，并且光损伤+玻璃体腔PBS注药组M．opsin和S-opsin的形态均明显受损。结论50001ux白色冷光源对BALB／c小鼠进行6h持续照射可对视网膜光感受器视锥细胞的功能和形态产生严重损伤。玻璃体腔注射LIF对视网膜光感受器视锥细胞光损伤具有保护作用。博士学位论文中文摘要第二章氧化损伤条件下STAT3、ERKI／2和AKT信号通路激活促进661W细胞存活目的研究过氧化氢(hydrogenperoxide，H202)对鼠视网膜光感受器视锥细胞661W细胞株细胞活性的影响，并探讨在氧化损伤条件下信号传导子与转录激活因子3(signaltra

7、nsducerandactivatoroftranscription3，STAT3)信号通道、细胞外信号调节激酶1／2(extraceUularsignal-regulatedkinase1and2，ERKl／2)信号通道和蛋白激酶B(proteinkinaseB，PKB(AKT))信号通道对661W细胞株细胞活性的影响。方法体外培养鼠视网膜光感受器视锥细胞661W细胞株。(1)不同浓度H202(O，0．25，0．50，0．75，lmM)干预12h，采用MTT方法检测661W细胞株细胞活性；(2)运用不同浓度H202(O，0．005，0．01，0．05，0．5，

8、lmM)干预661W细胞