粒细胞集落刺激因子对小鼠急性脊髓损伤的神经保护作用及其机制.pdf

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1、第43卷第6期解剖学报Vo1．43．NO．6·734·2012年12月ACTAANATOMICASINICADec．2012粒细胞集落刺激因子对小鼠急性脊髓损伤的神经保护作用及其机制张慧郭雨霁邴鲁军刘尚明郝爱军(山东大学医学院组织胚胎学教研室，实验畸形学教育部重点实验室，济南250012)[摘要]目的探讨粒细胞集落刺激因子(G-CSF)对急性脊髓损伤条件下神经保护作用的具体机制。方法建立小鼠半切脊髓损伤模型。体内实验于造模成功术后第1天开始，给予G—CSF，连续3天，进行Basso—Beattie—Bresnahan(BBB)评分后处死，取脊髓组织进行免疫荧

2、光及免疫印迹(Westernblotting)检测。体外培养神经元，建立机械损伤细胞模型，进行形态学观察及缺口末端标记(TUNEL)染色。结果G—CSF能够促进急性脊髓损伤后运动功能的修复，粒细胞集落刺激因子受体与核磷蛋白(NPM1)特异性表达在神经元上，而且G．CSF的使用能促进NPM1的表达，损伤脊髓组织内的凋亡神经元减少。体外实验结果显示，使用核磷蛋白特异性的抑制剂NSC348884能降低G—CSF对神经元的保护作用，凋亡细胞增多。结论在急性脊髓损伤中应用G—CSF可以促进损伤脊髓运动功能的修复，对神经元有明显的保护作用，这种保护作用可能是通过NPM1

3、的抗凋亡作用而实现的。[关键词]脊髓损伤；粒细胞集落刺激因子；核磷蛋白1；缺口末端标记染色；小鼠[中图分类号]R651．2[文献标志码]A[DOI]10．3969／j．issn．0529—1356．2012．06．003Neuronalprotectiveefectofgranulocyte-colonystimulatingfactoranditsrelatedmechanisminacutespinalcordinjuryZHANGHui，GUOYu—ji，BINGLu—jun，LIUShang．ming，HAOAi—jun(DepartmentofHi

4、stologyandEmbryology，SchoolofMedicine，ShandongUniversity，Ji’nan250012，China)[Abstract]0bjectiveToexplorethemechanismofgranulocyte—colonystimulatingfactor(G—CSF)onneuronalprotectivefunctioninacutespinalcordmodelmice．MethodsHemi—sectioninjurywasproducedbycuttingone—halfoftherightlate

5、ralportionsofthespinalcord．Afterthesurgerythemouseacceptedanintraperitonealinjectionofrecombinanthumangranulocytecolony—stimulatingfactor(rhGCSF)，onceadayfor3days．BehaviorofthemousewasanalyzedwithBasso-Beattie-Bresnahan(BBB)locomotorratingscale．Thespinalcordofthemousewasthendissect

6、edandexaminedwithhistologicalimmunofluorescenceandWesternblottinganalysis．Weestablishedneuronmechanicalinjurymodelinvitro．MorphologicalchangeswereobservedandTUNELstainingwasusedtoinvestigatetheapoptosis．ResultsIntheG—CSFgroup，improvementinhindlimbmotorfunctionwassignificantlygreate

7、rthanthatintheinjurygroup．G．CSFreceptorwasexpressedspecificallyontheneurons．AftertreatmentwithG·CSFinacutespinalcordinjury，nucleophosmin1(NPMI)expressionwassignificantlyincreasedandapoptoticcellsdecreased．AftertreatmentwithNSC348884，aspecificnueleophosmininhibitor，inneuronmechanica

8、linjurymodelinvitro，apopto