粒细胞集落刺激因子对急性脊髓损伤中小胶质细胞的作用.pdf

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1、第50卷第5期山东大学学报(医学版)2012年5月Vo1．50NO．5JOURNALOFSHANDONGUNIVERSITY(HEALTHSCIENCES)Mav2012文章编号：1671—7554(2012)05—0010—05DOI：10．6040／j．issn．1671-7554．2012．05．003·基础医学·粒细胞集落刺激因子对急性脊髓损伤中小胶质细胞的作用张慧，郭雨霁，郝爱军，马保华(山东大学医学院组织胚胎学教研室，济南250012)摘要：目的探讨粒细胞集落刺激因子对急性脊髓损伤条件下小胶质细胞神经保护／损伤功能转变的影响。方法建立小鼠半切脊髓损伤模型。体

2、内实验是造模成功术后第1天开始给予粒细胞集落刺激因子，连续3d，进行Basso．Beattie．Bresnahan(BBB)评分后处死，取脊髓切片进行免疫荧光检测小胶质细胞的募集。体外实验是取小鼠脊髓的组织上清液，加到小胶质细胞株BV一2培养基中共培养24h，治疗组加入粒细胞集落刺激因子12h后收集细胞。采用RT—PCR和免疫印迹法，检测小胶质细胞炎症因子的分泌及信号通路的改变。结栗粒细胞集落刺激因子能够促进急性脊髓损伤后运动功能的恢复，促进小胶质细胞募集。体外实验结果显示，粒细胞集落刺激因子可以降低小胶质细胞NF．KB信号通路p65的活性，改变小胶质细胞因子的分泌，促

3、炎性因子IL一1p表达降低，抗炎因子TGF13表达升高。结论应用粒细胞集落刺激因子治疗脊髓损伤可以促进小鼠运动功能的恢复并调节小胶质细胞的分布和功能，诱导小胶质细胞向神经保护的方向转化。关键词：脊髓损伤；粒细胞集落刺激因子；小神经胶质细胞；神经保护药中图分类号：R329．3文献标志码：AEffectofGranulocyte—colonystimulatingfactoronmicroglialfunctionintheacutespinalcordinjurymicemodelZHANGHui，GUOYu-ji，HAOAi-jun，MABao—hua(Departme

4、ntofHistologyandEmbryology，SchoolofMedicine，ShandongUniversity，Jinan250012，China)Abstract：0bjectiveToexplorethealterationofmicroglialprotection／injuryfunctioncausedbygranulocyte—colonystimulatingfactor(G-CSF)intheacutespinalcordi~urymicemode1．MethodsHemi—sectioninjurieswereproducedbycutt

5、ingone—halfofthefightlateralportionofthespinalcord．Aftersurgerythemiceweregivenanintraperitonealin—jectionofrhG—CSF，whichcontinued3days．TheBasso—Beattie—Bresnahan(BBB)locomotorratingscalewasusedtOanalyzebehaviorandthenthespinalcordwastakenoutforhistologicalanalysisbyimmunofluorescencetoo

6、bservetheaccumulationofmicrogliainvivo．MicroglialcelllineBV-2cellswerepretreatedwithnormalandinjuryspinalcordSU—pernatantfor24h，followedbya12hadministrationofG—CSF(100ng／mL)，thenharvestedthecells．RT—PCRandWesternblotwereemployedtOevaluatethechangesofmicroglialcytokinesandpathwaysinvitro．

7、ResultsIntheG—CSFtreatmentgroup，improvementinhind—limbmotorfunctionandaccumulationofmicroglialcellweresignificantlygreaterthaninthesham—treatment(vehicle)group．Astheresultsinvitroshowed，intheG—CSFtreatmentgroup，theactivityofNF—KBp65wasinhibitedandthesecretionofmicroglialc