紫铆花素对大鼠急性脊髓损伤后的神经保护作用及其机制的实验研究

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1、中图分类号密级紫铆花素对大鼠急性脊髓损伤后的神经保护作用及其机制的实验研究NeuroprotectionandMechanismsofButeinonAcuteSpinalCordInjuryinRats计：学位论文：91页表格：2个插图：12幅指导教师：吕德成教授申请学位级别：博士学位培养单位：大连医科大学鲁明学科(专业)：中西医结合临床完成时间：二。一三年四月答辩委员会主席：独创性声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地

2、方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得大连医科大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名：1H¨柱石昂关于学位论文使用授权的说明本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。本人授权大连医科大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存

3、和汇编本学位论文。本学位论文属于(请在以下相应方框内打“√”)：1．保密口，在一年解密后适用本授权书。2．不保密瓯储躲密司吼Ⅺ。聋霸怖导师签名：乙乡《多<、日期：芦哆年r月砰日目录一、摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯1(一)中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯1(二)英文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯4二、正文⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯8第一部分紫铆花素改善大鼠急性脊髓损伤后神经功能的实验研究(一)前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

4、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯8(二)材料和方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯91．实验材料⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯91．1．实验动物⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯91．2．主要试剂⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯91．3．主要仪器⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯92．实验方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯92．1．制备紫铆花素溶液及其他所需溶液⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯92．2．大鼠脊髓损伤模型的建立⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯92．

5、3．大鼠脊髓损伤后神经功能评价⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯1O2．4统计学分析⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯13(三)结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯131、紫铆花素改善急性脊髓损伤后大鼠后肢运动功能的恢复⋯132、紫铆花素改善急性脊髓损伤后大鼠后肢感觉及神经反射的恢复⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯13(四)讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯15(五)小结⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯17(六)参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯18第二部分紫铆

6、花素抑制大鼠急性脊髓损伤后炎症反应和细胞凋亡的实验研究(一)前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯21(二)材料和方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯211．实验材料⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯211．1．实验动物⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯211．2．主要试剂⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯221．3．主要仪器⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯222．实验方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯232．1．制备紫铆花素溶液及其他所需

7、溶液⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯232．2．大鼠脊髓损伤模型的建立⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯242．3．组织样品制备⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯242．4．脊髓组织水肿的检测⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯242．5．免疫组织化学检测脊髓损伤后组织中iNOS、Bax军NCaspase一3的表达⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯242．6．免疫印迹分析MCP．1、Bax、Caspase一3和iNOS蛋白表达(Westernblot)⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯252．7．大鼠脊髓损伤后MPO活性检测⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯2

8、72,8．TUNEL法检测脊髓组织中细胞凋亡⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯282．9．统计学分析⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯28(三)结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯281、紫铆花素减轻急性损伤后脊髓组织的水肿⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯282、紫铆花素调节急性脊髓损伤后MCP一1的表达及中性粒细胞浸润⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯283、紫铆花素调节脊髓损伤后诱导型一氧化氮合成酶(inducibleNO．synthase，iNOS)的表达⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯