MalibatolA的神经保护作用及其机制研究

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1、TheinvestigationoftheprotectiveeffectsandmechanismsofMalibatolAincentralnerVOUSsystemADissertationSubmittedtoNanjingUniversityFortheAcademicDegreeofMasterofScienceBYHuangSi-yuanSupervisedbyProf．XUYunNanjingDrumTowerHospitalAffiliatedHospitalofNanjingUnive

2、rsityMedicalSchoolMay2011南京大学学位论文独创性声明本人郑重声明所呈交的学位论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得南京大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所作的任何贡献均己在论文中作了明确的说明并表示了谢意。研究生签名：铞元日期：j。JJ．玉．二D南京大学学位论文使用授权声明南京大学、中国科学技术信息研究所、国家图书馆有权保

3、留本人所送交学位论文的复印件和电子文档，可以采用影印、缩印或其他手段保存论文。本人电子文档的内容和纸质论文的内容相一致。除在保密期内的保密论文外，允许论文被查阅和借阅，可公布论文的全部或部分内容。论文的公布(包括刊登)授权南京大学研究生院办理。研究生签名：瑁刚融亢导师签名：勺；乏三日期：·x“‘上勘南京大学硕士学位论文毕业论文题目：!鱼鏖医堂专业2009指导教师(姓名、职称)：中文摘要目的：MalibatolA(MA)是本实验室自我国特有海南植物坡垒树叶中提纯并鉴定的化合物，具有抗氧化活性；本实验拟通过体

4、内外实验证实MA是否具有神经保护作用；进一步研究其机制是否通过活化PPARY促进小胶质细胞处于替代型活化状态，抑制炎症反应，起到脑保护作用。方法：第一部分实验：1．原代神经元培养、鉴定及分组处理；2．MTT法检测不同MA剂量处理(12．5、25、50、100、200um)神经元存活率，选取最佳有效剂量；3．PI染色流式细胞技术检测神经元死亡率；4-，J、鼠大脑中动脉栓塞(MCAO)模型建立及处理；5．丌c染色法检测不同MA剂量处理(5、10、20、40mg／kg，8mg／m1)24h后小鼠脑梗死体积，选取

5、最佳有效剂量；6．／J、鼠行为学评分检测小鼠神经功能改善情况。第二部分实验：1．体外实验检测MA处理后活性氧自由基(ROS)变化；2．体内实验检测线粒体膜电位变化；3．定量PCR检测小鼠皮层炎症介质表达情况；4．体外流式细胞技术体内定量PCR技术检测替代型小胶质细胞表面标记CD206表达水平；5．westernblot及免疫共沉淀方法检测PPARy及其SUMO化水平。结果：MA具有神经保护作用，可以改善神经功能，减少神经元死亡，体外实验最佳有效剂量为25um，体内实验最佳有效剂量为20mg／kg，8mg／

6、ml；体外实验证实MA可以显著降低H202损伤后ROS水平(p

7、ARY活性，促进小胶质细胞处于替代型活化状态，减轻炎症反应。关键词：MalibatolA；缺血性卒中；氧化应激：炎症反应；小胶质细胞；PPARY南京大学硕士学位论文THESIS"．Theinvestigationofthepro—te—ct—i—v———e—————e————ff———e————c———t．．s．．．．．a．．．n．—．．d．．．．．m．．．．．e．．．c．．．．h．．．a．．．．n．．．i．s．．．．m．．．．．s．．．．．o．．．f．．．．M．．．．．a．．．1．i．．b．．．a．．．

8、t．．o．．．1．．．A．—●——●_1r_______________________。_________________●_●_。_。__________________________________________________________________________________________________________________________●___________________-。__