rna干扰抑制hmgb1基因表达对子宫内膜癌细胞增殖作用的研究

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1、万方数据中图分类号＆Z!!UDC61O硕士学位论文学校代码!Q§三三密级公珏RNA干扰抑制HMGBl基因表达对子宫内膜癌细胞增殖作用的研究EffectonProliferationofHumanEndometrialCancerCellbyRNAiInhibitingHMGB1GeneExpression作者姓名：学科专业：研究方向：学院(系、所)：指导教师：吴然然临床医学妇产科学湘雅医院吴佳捷教授论文答辩日期丕!生：篁：签答辩委员会主席中南大学二O一四年五月～蛩奉万方数据学位论文原创性声明』lllllllllllllllllllllllllllY26——85————65一．——

2、0——本人郑重声明，所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除了论文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得中南大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我共同工作的同志对本研究所作的贡献均已在论文中作了明确的说明。申请学位论文与资料若有不实之处，本人承担一切相关责任。储签名：墼日期：丝年土月五日学位论文版权使用授权书本学位论文作者和指导教师完全了解中南大学有关保留、使用学位论文的规定：即学校有权保留并向国家有关部门或机构送交学位论文的复印件和电子版；本人允许本学位论文被查阅和借阅；学校可

3、以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用复印、缩印或其它手段保存和汇编本学位论文。保密论文待解密后适应本声明。作者签名：二数日期：二坦年上月互El导师签名里堕万方数据摘要RNA干扰抑制HMGBl基因表达对子宫内膜癌细胞增殖作用的研究目的：通过RNA干扰抑制子宫内膜癌细胞中高迁移率族蛋白1(Highmobilitygroupbox1，HMGBl)的表达，研究HMGBl对子宫内膜癌细胞的增殖及细胞周期、细胞凋亡的影响，并探讨其分子机制。方法：构建靶向HMGBl基因的慢病毒shRNA载体，转染子宫内膜癌细胞株HEC．1A，同时利用实时荧光定量聚合酶链反应法(Rea

4、ltime．PCR)和免疫印迹法(WesternBlot)检测转染HMGBl．siRNA后细胞删GBlrnJⅢA和蛋白表达水平的变化。MTT法和流式细胞术分别检测转染HMGBl．siRNA后HEC．1A细胞增殖、细胞周期和细胞凋亡的变化。WesternBlot法检测转染HMGBl一siRNA后细胞AKT、pAKT和CyclinDl蛋白的表达水平。结果：1、子宫内膜癌细胞株HEC．1A转染慢病毒重组质粒后，荧光显微镜下可见细胞表达较强的荧光信号，转染效率达80％左右，说明转染成功。2、子宫内膜癌细胞转染慢病毒72h后，Realtime．PCR结果显示：实验组细胞中HMGBlmRNA

5、表达较空白对照组和阴性对照组降低(P

6、率以及细胞总凋亡率均高于空白对照组和阴性对照组(P0．05)，而实验组细胞中pAKT和CyclinDl蛋白表达水平均较空白对照组和阴性对照组降低(P

7、数据硕士学位论文AbstractE脏ctonProliferationofHumanEndometrialCancerCellbyRNAiInhibitingHMGB1GeneExpressionAbstractObjective：UsesmallinterferingRNA(siRNA)forsilencetheexpressionofhighmobilitygroupboxI(HMGB1)inendometrialcancercell．Toinvestigatetheeffe